GSTpi在慢性髓系白血病细胞中的表达及作用研究.pdf

中南大学
硕士学位论文
GSTpi在慢性髓系白血病细胞中的表达及作用研究
姓名:夏嘉志
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:陈汉春;张殿政
20090501
摘要枪入赘孰腟一转移酶殖乒入赘孰淖A蛎家族的重要成员,由一个活跃的多态性基因编码。鞍字实脑谔骞δ是清除毒物,避免基因组的损伤,同时可与许多耐药相关基因共表达而成为肿瘤细胞对化疗药物或生物治疗剂耐受的重要原因之一。慢性髓细胞性白血病是一种起源于骨髓多能造血干细胞的恶性增殖性疾病;干扰素一琁侵瘟艭的有效制剂之一,但部分患者呈现对瘟菩вΦ哪褪堋本课题以呈现对猀治疗效应不同敏感性的諧细胞株:—疉疉和细胞为研究对象,以抗固寰胞猵免疫组化法和分析这些赴璉—砬啊⒑蟮腉蛋白质表达水平的差异,结果表明处理前与处理后的一疉细胞的鞍字时达水平显著高于/细胞,而细胞则完全不表达白质;细胞免疫荧光染色后经激光共聚焦显微镜观察发现,—疉和—疉赴蠫蛋白质主要分布于细胞质,而细胞中未见鞍字时泶铩在上述发现的基础上,,细胞免疫荧光染色后经激光共聚焦显微镜观察证实了经猀处理前后其重组载体的细胞表达差异和亚细胞定位;采用流式细胞术检测细胞凋亡率和台盼蓝拒染实验分析细胞成活率的结果表明,刈樵靥宓谋泶锩飨越档蚄疉赴腎—从π裕,硕士学位论文
并不改变细胞的鸵┨卣鳎欢运惺笛樽镃细胞的酶活性检测发现,—疉赴璉~砗笃鋍一富钚悦飨栽龈撸转染组—疉赴璉处理后其富钚悦挥忻飨改变,转染组细胞经砗笃鋍酶活性略有升关键词慢性髓细胞性白血病,琁—琧一高。
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作者虢勉新签名丝嗍碑年上月血日期:堕年麦稳作者签名:,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了论文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均己在论文中作了明确的说明。本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文,允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部分内容,可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。
.酱古一刖内,等量血液中的白细胞数量是健康人的至倍。白细胞的大量增加是扇潘刂瘟坡运柘赴园籽2百运柘赴园籽2〉母攀黾爸瘟慢性髓细胞性白血病,是一种造血干细胞克隆增生性疾病,以髓系增生、外周血白细胞增多及脾脏肿大为主要特征。%以上患者骨髓细胞中存在特征性的费城染色体,蹦殉侨旧迨怯闪蕉匀旧宓牟糠只セ徊摹5号染色体分离的部分转移到了第号染色体,而第号染色体的一部分则转移到了第湃旧澹庵窒窒蟪谱魅旧逡孜弧U庵窒赴湟煸サ腃患者中都可以见到,是该病的特征性标志即;易位重排。分子生物学研究发现费城染色体会产生一种酶,这种酶在异常细胞的生长和分裂中起到了核心作用。这种酶被称为捌即融合蛋白质酪氨酸激酶,它能够改变细胞的正常基因指令,干扰其停止制造白细胞的信号。导致的结果是,在健康人的体内,一立方毫米的血液中含有至霭紫赴谝桓鯟患者的体的特征。本病经历从慢性期珻演变为加速期琣而最终进入急变期珺这样一个病理演变过程;哪攴⒉÷饰/万,约占成人白血病的%ィ叻宸⒉∧炅湮岁,男性:女性患病比为:M忠旎蚬撬枰浦布词褂霉撬柘嘟木献者的健康干细胞是颊吣壳白罴训闹瘟品桨福墙鲇プ笥业幕颊哂条件做这样的移植手术。原因有多种,如找不到合适的骨髓捐献者,或患者年龄太大或其它复杂的医学原因;对于一些患者,另一个方案是自体骨髓移植,即在经过强烈化疗和辐射治疗之后使用其自身的造血干细胞∞>」苷庵至品芄谎长患者的寿命,但几乎所有接受骨髓移植的患者最终都会复发,其中部分原因就是他们的体内仍藏有恶性的赴D壳坝幸幌盗械囊┪锟捎糜谥瘟艭,包括干扰素一,、羟基脲⑻前、白消安和格列卫等。硕上学位论文前言
干扰素琁蔷哂泄惴嚎共《尽⒖怪琢龊途哂忻庖叩鹘谧饔的可溶性糖蛋白。依据岷夏な芴宓男灾剩獻分为两大类即透扇潘和型干扰素,透扇潘丶从隝型干扰素受体结合,包括四个亚型:猟、狟、和猅;型干扰素即与型干扰素受体结合,型干扰素只有猋,又称免疫干扰素。年陋缺ǖ赖ビ锰烊桓扇潘治疗颊渲例裱R貉Щ航猓例’染色体消失。此后关于天然和重组干扰素治疗牧菩Ч鄄毂砻餮R貉Щ航饴饰%中