银芩胶囊、芩连胶囊及rhugm-csf抗流感病毒实验的分析研究.pdf

论文独创性声明本论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致游的地方外,不包含其他入或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中佧了明确的声明并表示了谢意。作者签名;—纽.,~ 日期论文使用授权声明。、馒用学位论文的援定,即:学校有权保留迸交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅:学校可以公布论文的全部或部分内容,可‘以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定。作者签名:一董!垒. 导}琴签名:鲰一民联:!!:竺:丝复¨人中硕七论文第1狐中文摘要本研究系统地应用狗肾细胞(MDCK细胞)模型和小鼠模型对中药复方银芩胶囊干¨芩连胶囊及重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子()进行了体内、外的抗流感病毒作用的实验研究。体外实验以MDCK细胞为模型,采用MTT法检测药物对细胞存活率的影响,即药物毒性浓度测定;以药物对流感病毒导致的细胞病变(Cytopathic effect,CPE)的抑制率为指标,确定药物体外抗流感病毒有效浓度。结果显示,银岑胶囊和芩连胶囊在体外均可有效抑制流感病毒相关CPE的形成。银芩胶囊的最大无毒浓度(TC。)为 ,50%毒性浓度(‘l'Cso),对流感病毒50%有效抑制浓度(IC50) ,治疗指数(TI)。琴连胶囊的Tco为12599/mL,Tc5()为 ¨∥mL,∥mL,。,因此采用从人抗凝静脉血中分离的外周血单个核细胞(PBMC)为受体细胞,将PBMC在体外与rttuGM—CSF共培养3天后,,PBMC与8099/,其细胞上清对CPE的抑制率可超过50%。rHuGM—CSF的Tco为20099/mL, Tc5()为 , ,。体内实验以昆明种小鼠为动物模型,小鼠感染病毒后2小时开始给药,银芩胶囊和芩连胶囊都采用口服给药(银芩胶囊每日2次,芩连胶囊每日1次),共连续给药六天,从感染之日起连续观察14天。rHuGM—CSF采用预防性治疗给药的方式,在小鼠感染病毒前先滴鼻给药7天,每日1次,接种病毒后再滴鼻给药3天,从感染之H 起连续观察14天。通过流感病毒感染小鼠的死亡牢、生命延长情况及肺病变程度指标判定其抗流感病毒作用。结粜表明,试验药物均能减少流感病毒感染小鼠的死亡牢, 延长存活时间,减轻小鼠肺组织病变程度。、 g/kg/d银芩胶囊,对流感病毒感染小鼠的死亡保护牢分别为40%、20%}11 5%,%o、 %%,%、%。口服4、 2、 l、 ∥kg/d芩连胶囊,对流感病毒感染小鼠的死亡保护率分别为40%、30%、复H人学硼十论文 30%、20%;fUO%,%、%、%、40-2%%,口服芩连胶囊4、 ,%、%%。鼻腔途径给予1 34、 mg/kg/d的rHuGM—CSF,对流感病毒感染小鼠的死亡保护枣分别为80%、55%章u 50%,%、%311 %,%、%%。以卜实验数据表明,银芩胶囊平u芩连胶囊具有赢接抑制流感病毒在宿主细胞内复制的作用,并¨对模型小鼠的病毒性肺炎疗效显著,能有效降低感染小鼠的死亡率, 延长存活时间和减轻小鼠肺组织病变程度。,采用经鼻途径预防性给药治疗方式亦可对模型小鼠产生显著的保护作用。这些实验结果为银芩胶囊和琴连胶囊的治疗功效提供了抗流感病毒的实验依据, 为其开展临床试验提供了有力的支持,,本研究取得的结果也为建立抗流感病毒药物疗效和机制研究的平台奠定了蕈要的工作基础。关键词流感病毒; 抗病毒作用; 银岑胶囊;芩连胶囊重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子() 复11人‘Z硕十论迁第3血 Study on the anti—influenza virus effects ofYinqin capsules, Qinlian capsules and rHuGM—CSF