[生物工程精品] 粗毛栓菌木聚糖酶的分离和纯化 本科毕业设计[相关表格].doc

本科生毕业设计(论文)开题报告
毕业设计(论文)题目
粗毛栓菌木聚糖酶的分离与纯化
题目类型
实验
题目来源
指导教师拟定
系别
生命科学系
专业
生物工程
指导教师
XXX
职称
教授
姓名
XXX
年级
2006
学号
XXX
一、立题依据(国内外研究进展或选题背景、研究意义等)
对木聚糖酶的研究早在60年代就已开始,已经从不同来源的微生物中分离得到大量的不同类型、不同功能的木聚糖酶。粗毛栓菌Trametes gallica Fr. 是一种白腐担子菌,在我国分布广泛,是杨木的一种主要生物降解者。已有研究表明,该菌具有较强降解木质纤维素的能力。国内外对木聚糖酶的研究已有较多的报道,但对粗毛栓菌产木聚糖酶的分离纯化以及酶学性质等方面的研究较少。在我国,对木聚糖酶的研究最近十几年才开始,但现在基本上海限于对产木聚糖酶天然优良菌株的筛选、木聚糖酶纯化及性质分析上,仅克隆了少数木聚糖酶基因,运用基因工程手段,产业化产木聚糖酶产品还未见报道。木聚糖被广泛应用于饲料、食品、纺织、造纸等工业,已体现出重要的商业价值。国内外对木聚糖酶的研究已有较多的报道,但对粗毛栓菌木聚糖酶的双功能性质的研究较少,本研究尝试对粗毛栓菌木聚糖酶双功能的研究,进一步了解粗毛栓菌木聚糖酶既能降解木聚糖,又能降解纤维素的双功能,可满足不同领域对木聚糖各种特性的需求,同时,为人工构建双(多)功能酶提供了科学依据和技术基础。
二、研究的主要内容及预期目标
1、本文主要测定了粗毛栓菌在一种以麦草粉为诱导物的培养液中的产木聚糖酶情况,并对酶的一些基本性质进行了研究,以便为其在生产中的应用提供理论依据。
2、对粗毛栓菌产木聚糖酶的分离纯化及其部分性质进行初步研究。
3、对粗毛栓菌木聚糖酶进行纯化, 并对性质进行探讨, 以便为木聚糖降解的研究提供一定的科学依据, 同时为在造纸工业和食品加工上的应用提供一定的理论依据。
三、研究方案(思路)
1、粗酶液的制备;
2、初步硫酸铵盐析;
3、Sephadex G-150分子筛层析;
4 、毛栓菌木聚糖酶的活性聚丙烯酰胺凝胶电泳。
四、论文进度安排
4月5日,粗酶液的硫酸铵盐析,离心,透析;
4月7日,盐析后酶液的酶活测定;
4月10日,准备Sephadex G-150分子筛层析柱;
4月13日,上样,洗脱;
4月16日,测各管酶活;
4月20日,准备输水层析柱;
4月21日,平衡,上样,洗脱;
4月24日,测各管酶活;
4月27日,整理数据,撰写论文。
五、主要参考文献
[1],39(2):175-179.
[2]-木聚糖酶与β葡聚糖酶-植酸酶融合酶的优化构建及其酶学特
分析,浙江大学博士论文,5-5.
[3],2-2.
[4]XXX,任少亭,. 粗毛栓菌降解麦草木质纤维素的实验研究, 微生物学杂志,
22(1):24-26.
[5]张承圭,王传怀,. 高等教育出版社,北京.
[6] . 北京:化学工业出版社,1-329.
[7] . 四川大学博士论文, 44-44.
[8] Elisashvili, V. I., Khardziani T. S. and Tsiklauri N. D..1999. Cellulase and xylanase activities in higher basidiomycetes. Biochemistry , 64 (6): 718-22.
[9] Bradford MIN. rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye biding. Analytical Biochemistry, 72 (0): 248-254.
[10] Miller, G. . Use of dinitrosalicylic acid reagent for determination of reducing sugar. Anal. Chem, 31 (3): 426-428.
[11] . 1999年12月第二版. 中国协和