5×蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂)使用说明.doc

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5 X蛋白上样缓冲液（含巯基还原剂）使用说明
货号：P1041
规格:10ml
保存：-20 C保存，自发货之日起至少 3个月有效。
产品简介：
5X蛋白上样缓冲液（含巯基还原剂）适用于 SDS-PAGE（SD变性聚丙烯酰***凝胶电泳）时作
蛋白质上样用。其主要成份为 SDS巯基还原剂，溴酚蓝，缓冲盐溶液等。
SDS可与蛋白质结合使蛋白质一SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完 全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异， SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，
破坏蛋白质分子的二级和三级结构， 巯基还原剂可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键， 破坏
蛋白质的四级结构，消除了蛋白结构之间的差异。 最终无电荷及结构上差异的蛋白 （亚单位），
电泳速度只是与其分子量大小有关。 溴酚蓝用作电泳时的指示剂， 可大概指示电泳结束的时
间。
使用说明：
请按每40 yL蛋白样品加入10 yL上样缓冲液的比例（5 倍稀释）来使用。如果蛋白浓 度过高，可用双蒸水稀释。
混匀后， 100 C水浴加爆5分钟，使蛋白变性。
冷却到室温后， 10000-14000离心、2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。
注意事项：
聚丙烯酰***凝胶浓度为 8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在
30kd左右，胶浓度12%时，
约在20kd左右，胶浓度15%寸，大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
本试剂因含巯基还原剂， 有一定的毒性，为了您的安全和健康， 请穿实验服并戴一次性
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手套操作。
蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂， 值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液
可能会呈现深棕色，不影响产品使用。
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