小鼠苹果酸脱氢酶(MDH)说明书.doc

小鼠苹果酸脱氢酶(MDH)说明书.doc1
小鼠苹果酸脱氢酶（MDH酶联免疫分析（ELISA ）
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，组织匀浆
及相关液体样本中苹果酸脱氢酶（MDH的含量。
实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠苹果酸脱氢酶 （MDH）水平。用纯化的小鼠
苹果酸脱氢酶（MDH）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入苹果酸 脱氢酶（MDH），再与HRP标记的苹果酸脱氢酶（MDH）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体 复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸
的作用下转化成最终的黄色。 颜色的深浅和样品中的苹果酸脱氢酶 （MDH）呈正相关。用酶标
仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠苹果酸脱氢酶 （MDH）
浓度。
试剂盒组成
试剂盒组成
48孔配置
96孔配置
保存
说明书
1份
1份
圭寸板膜
2 片(48)
2 片(96)
密封袋
1个
1个
酶标包被板
1X 48
1X 96
2-8 C保存
标准品：135 U/L
X 1 瓶
X 1 瓶
2-8 C保存
标准品稀释液
X 1 瓶
X 1 瓶
2-8 C保存
酶标试剂
3 ml X 1 瓶
6 ml X 1 瓶
2-8 C保存
样品稀释液
3 ml X 1 瓶
6 ml X 1 瓶
2-8 C保存
显色剂A液
3 ml X 1 瓶
6 ml X 1 瓶
2-8 C保存
显色剂B液
3 ml X 1 瓶
6 ml X 1 瓶
2-8 C保存
终止液
3ml X 1 瓶
6ml X 1 瓶
2-8 C保存
浓缩洗涤液
(20ml X 20 倍)X 1 瓶
(20ml X 30 倍)X 1 瓶
2-8 C保存
样本处理及要求：
1•血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转份）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
血浆：应根据标本的要求选择 EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 10-20分钟后，离心
20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次 离心。
尿液：用无菌管收集，离心 20分钟左右（2000-3000转份）。仔细收集上清，保存过程
中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20分钟左右（2000-3000转/
分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用 PBS（ - ）稀释细胞悬液，细胞
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浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20分
钟左右（ 2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的 PBS， 。用液氮迅速冷冻保存备
用。标本融化后仍然保持 2-8C的温度。加入一定量的 PBS （ ）,用手工或匀浆器
将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右（