实验三血糖测定.ppt

实验三血糖测定
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血液中所含的葡萄糖，称为血糖。它是糖在体内的运输形式。
目前国内医院多采用葡萄糖氧化酶法和邻甲苯***法测定血糖。前者特异性强、价廉、方法简单,其正常值：～（65～95毫克/分升），～。后者由于血中绝大部分非糖物质及抗凝剂中的氧化物同时被沉淀下来，因而不易出现假性过高或过低, 结果较可靠, 其正常值：～（60～100毫克/分升），～（70～115毫克/分升）。
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本实验采用邻甲苯***法测定血糖。其原理是葡萄糖在酸性介质中加热脱水反应生成5－羟***－2－呋喃甲醛，分子中的醛基与邻甲苯***缩合成青色（蓝绿色）的薛夫氏碱，通过比色可以定量。
基 本 原 理
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CH2OH
（CHOH）4
CHO
HOH2C─
─CHO
O
+ 3H2O
H+
△
HOH2C─
─CHO
O
NH2
CH3
+
HOH2C─
─CH =
O
N
CH3
葡萄糖
羟***糠醛
邻甲苯***
Schiff 碱
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操 作 方 法
1、标准曲线的制作
2、血糖浓度测定
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取干燥试管7支，编号后，按下表顺序加入试剂
管号
1
2
3
4
5
测定
空白
标准葡萄糖液(ml)





／
／
血清（ml）
／
／
／
／
／

／
蒸馏水(ml)




／


邻甲苯***试剂(ml)







A630
试剂
加毕，混匀，于沸水浴中煮沸10min取下，流水冷却，在630nm波长下，以空白管调零，测定各管的A值，并作好记录。
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标准葡萄糖应用液浓度为：
即1mg/ml
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结果处理
1、标准曲线的绘制（以1~5管绘制标准曲线）
×
×
×
×
×

（x，y）
mg





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2、计算结果
（1）从标准曲线上读取测定管的血糖浓度，
并求出1L血清中葡萄糖的含量。
（2）选取一管光密度与测定管接近的标准管
计算1L血清中葡萄糖的含量。结果与
标准曲线上查找的结果进行比较。
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邻苯甲***法测定血糖具有操作简单,特异性较高的优点, 试剂成本也较低,。但该法一般在浓酸高温条件下发生反应, 因此在做血糖测定时须多加注意。
注 意 事 项
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