略3略非洲猪瘟病毒荧光pcr检测试剂盒说明书和内包装标签.doc

附件2（略）
附件3（略）
非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒说明书和内包装标签
一、非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒说明书
兽用
【兽药名称】 取DNA。
荧光PCR反应体系的配制 取出试剂盒中的各组分，置室温（15～25℃）融化后瞬时离心，备用。每次检验设阴、阳性对照。设待检样品、阳性对照和阴性对照的样品总份数为n，按如下反应体系配制：
荧光PCR反应液
10μl×（n+1）
引物探针混合物
×（n+1）
无菌无核酸酶水
×（n+1）
总量
17μl×（n+1）
将以上配制的反应体系充分混匀后，分装至反应管中，每管17μl。分别取DNA样品3μl加入相应反应管中，盖紧管盖后瞬时离心。
荧光PCR反应条件
第一阶段：95℃ 20秒；
第二阶段：95℃ 1秒、60℃ 20秒，共40个扩增循环。
对于ABI荧光PCR仪，选择FAM通道读取检测结果，淬灭基团选择“MGB”；
对于其他品牌的荧光PCR仪，选定FAM通道读取检测结果，淬灭基团选择“None”。
2 试验成立条件 阳性对照Ct值＜35并出现典型的扩增曲线，阴性对照无Ct值并且无特异性扩增曲线，则判为试验成立。
3 判定 待检样品Ct值≤36并出现典型的扩增曲线，判为阳性；待检样品无Ct值并且无特异性扩增曲线，判为阴性；36＜Ct值≤40并出现典型的扩增曲线，判为疑似。对疑似样品，模板量加倍（即6μl DNA）进行复检（，其它体系不变），Ct值≤40并出现典型的扩增曲线判为阳性，无Ct值并且无特异性扩增曲线则判为阴性。
【注意事项】 （1）试剂盒应在-20℃以下保存和运输。
（2）本试剂盒仅用于体外检测使用，操作人员必须经过培训，试剂盒使用前请仔细阅读说明书全文。
（3）不要使用过期组分或者不同批次组分混合使用。
（4）使用时尽量避免反复冻融，如冻融，应不超过3次。
（5）样品采集和处理过程应戴一次性手套，并及时更换，样品间严禁交叉污染。
（6）荧光PCR实验严格分区操作，各区应有专用的手套、移液器等，不得交叉使用，避免污染；工作人员应遵循单方向工作原则，各工作区相对隔离。
（7）进行荧光PCR实验的工作桌面及相关物品应定期用1%次***酸钠、75%酒精、1mol/L盐酸依次灭菌和消毒，或定期用紫外灯灭菌和消毒。
（8）测试样品时，应做好生物安全防护。
（9）试验完毕后，使用过的试剂盒、样品和试剂应进行无害化处理。
【规格】 （1）10份/盒 （2）20份/盒 （3）50份/盒
【贮藏与有效期】 -20℃以下保存，有效期为12个月。
【批准文号】
【生产企业】
仅供兽医诊断使用
二、非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒内包装标签
兽用
牛病毒性腹泻/黏膜病、牛传染性鼻气管炎二联灭活疫苗（1型，NM01株+LN01/08株）
10（20、50）份/盒
批准文号：
批 号：
有效期至：
【用法与判定】 详见说明书。
【贮藏与有效期】 -20℃以下保存，有效期为12个月。