miR152对卵巢癌裸鼠移植瘤的抑制作用.pdf

miR-152对卵巢癌裸鼠移植瘤的抑制作用InhibitionE舭ctofm僻152ofHumanOvarianCancerTransplantinNudeMice导论文课题起止时间:至Q12生2旦二至Q!圣生圣旦中国医科大学(辽宁)2013年5月中国医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。论文作者签名:姻日期:.必企:丛中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学,且导师为通讯作者,通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外),以采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名:指导教师签名:日期:、摘要中文论著摘要························-1英文论著摘要·························3二、英文缩略语··························5三、论文前言·····························6日Ⅱ舌b材料与方法··························7实验结果···························9讨论·····························ll结论·····························12四、本研究创新性的自我评价····················13五、参考文献···························14六、附录综述·····························16致谢·····························26个人简介···························27·中文论著摘要·mR-I52对卵巢癌裸鼠移植瘤的抑制作用目的微小RNA(miRNA)为一类在动植物中广泛存在的非编码小RNA,由21"--25个核苷酸构成。miRNA参与了生命过程中一系列的重要过程包括早期发育、细胞增殖、分化、凋亡、死亡。近期的研究还发现,多个miRNA与肿瘤的发生、病理分级、临床分期、耐药性、诊断、治疗和预后密切相关。此外,在miRNA靶基因数据库中发现表达异常的miRNA所靶定的基因竟然占据了所有知名的癌基因的44%之多。更加确定了miRNA与肿瘤存在不可忽视的关系。近年来研究表明,miRNAs在细胞生长、分化、和凋亡等过程中发挥重要作用,与肿瘤的发生、发展及预后紧密相关。卵巢癌在妇科肿瘤中死亡率最高,尽早发现卵巢癌的诊断性标志物及有效的靶向治疗手段对卵巢癌的早期诊断及治疗是至关重要的。在本研究中,我们参考国内外相关文献及前期关于卵巢癌的miRNA表达谱的研究,初步确定miR-152为我们的研究重点。通过使卵巢癌细胞中过表达miR-152、构建卵巢癌裸鼠移植瘤模型、测量肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线、计算抑瘤率研究其在实体瘤中的抑瘤作用,探索miR一152与卵巢癌裸鼠转移瘤相关性,对进一步明确卵巢癌发生机制及治疗有着重要的意义。方法一、瞬时转染miR-152向卵巢癌细胞系中(OVCAR3)转染miR-152,使miR一152在卵巢癌细胞中过表达,通过RT—PCR验证转染效率。二、mR一152对卵巢癌裸鼠移植瘤的作用收集转染后的卵巢癌细胞系(OVCAR3),分为实验组,阴性对照组、空白对照组,分别注射于裸鼠颈背部皮肤,建立裸鼠移植瘤模型,测量肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线,计算肿瘤抑制率。结果一、验证miR-152转染OVGAR3细胞成功OVCAR3在转染fmiR-i52mimics后,经real-timePCR检测验证,转染了miR-152mimics的实验组细胞中,miR-152的表达水平较对照组有所提高。二、mR-|52对卵巢癌裸鼠移植瘤的作用成功建立裸小鼠移植瘤模型,观察45天后,发现转染3"miR一152的实验组细胞体内成瘤能力显著下降,与空白对照组及阴性组相比,%,%结I"4论_miR一152过表达抑制卵巢癌细胞OVCAR3体内成瘤。关键词miR一1521卵巢癌