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土壤微生物量碳测定方法.docx


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土壤微生物量碳测定方法及应用
土壤微生物量碳(Soil microbial biomass )不仅对土壤有机质和养分的循环起着主要
作用,同时是一个重要活性养分库,直接调控着土壤养分(如氮、磷和硫等)的保持和释放
及其植物有效性。近4积(5ml)
V2 ——滴到终点时消耗硫酸亚铁溶液体积(ml)
(6)去乙醇氯仿制备:在通风橱中,将分析纯氯仿与蒸储水按1: 2 (V:V)加入分液漏斗中,
充分摇动1 分钟,慢慢放出底层氯仿于烧杯中。如此洗3 次。得到的纯氯仿用无水氯化钙出
去氯仿中的水分,于试剂瓶中在低温(4℃)黑暗状态可保存几周(Williamss 等,1995)
三、仪器设备:
Phoenix8000碳-自动分析仪,50ml可调移液器,往复式振荡器(300 rev - min-1), 50ml
烧杯, 50ml 聚乙烯瓶,125 ml 聚乙烯瓶,150ml 消化管(24*295mm) , 250ml 三角瓶,50ml
酸式滴定管。土壤筛(孔径2mmi, 22cm真空干燥器,水泵抽真空装置,pH-自动滴定仪。
四、操作方法:
土样前处理:
新鲜土壤应立即处理或保存于4℃冰箱中,测定前仔细除去土样中可见植物残体(如根、
茎和叶 )及土壤动物(蚯蚓等),过筛(孔径2mm) ,彻底混匀。处理过程应尽量避免破坏土
壤结构, 土壤含水量过高应在室内适当风干,以手感湿润疏松但不结块为宜(约为饱和持水
量的40%) 。土壤湿度不够可以用蒸馏水调节至饱和持水量的40%。次样品即可用于土壤实时
测定。开展其他研究(如培养试验)可将土壤置于密闭的大塑料桶内培养7-15 天,桶内应有
适量水以保持湿度,内放一小杯1 mol • L-1NaOH容液吸收土壤呼吸产生的 CO,培养温度为
25℃ . 经过前培养的土壤应立即分析。如果需要保留,应放置于4℃的冷藏箱中,下次使用前
需要在上述条件下至少培养24 小时。 这些过程为消除土壤水分限制对微生物的影响,及植物
残体组织对测定的干扰。
土壤饱和持水量测定可按Shaw( 1958)的方法:在圆形漏斗茎上装一带夹子的橡皮管,
漏斗内塞上玻璃纤维塞,取50g 土壤于漏斗中,夹紧橡皮塞,加入50ml 水保持 30 分钟,然
后打开夹子并测定30 分钟内滴下的水的体积,加入的水量减以滴下的水量再加原来土壤中含
的水量即为该土壤的饱和含水量。
土壤熏蒸
称取经前处理的新鲜土壤(含水量为饱和持水量的40%) 3 份(烘干基重)土样于50ml
烧杯中, 用去乙醇氯仿熏蒸,方法是将其置于底部有少量水(约200ml) 和去乙醇氯仿( 40ml)
的真空干燥器中,氯仿加入烧杯中,并在其中放入经浓硫酸处理的碎瓷片(大小,防爆)。在
真空度下使氯仿剧烈沸腾3-5 分钟后,关闭真空干燥器阀门,移置在25℃黑暗条件下熏蒸土
壤 24 小时;然后将土壤转入另一干净真空干燥器中,反复抽真空()6 次,每次3 分钟,彻
底出去土壤中氯仿(残留在土壤中的氯仿对提取碳的测定有较大的影响) 。
在熏蒸同时,另取3 份 ( 烘干基重 ) 土壤于 125ml 提取瓶中(为不熏蒸对照) 。由于熏蒸过
程需要 24 小时,因此通常在熏蒸时,将不熏蒸土壤可置于4℃条件下保存。
土壤提取
将除去氯仿后的熏

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  • 时间2022-03-18
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