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· 928 · 医学动物防制 2006 年 12 月第 22 卷第 12 期
胶体金免疫层析法在早孕检测中的应用
陈丽
448000 荆门职业技术学院湖北省荆门市
摘要目的:免疫层析法是将特异的抗体先固定于硝酸纤维素膜的某一区带,当该干燥的硝酸纤维素膜一
端浸入样品(尿液或血清) 后,由于毛细管作用,样品沿该膜向前移动,当移动至固定有抗体的区域时,样品中相应
的抗原与该抗体发生特异性结合,若用免疫胶体金染色可使该区域显色。胶体金标记稳定、易贮存,常用于定性或
半定量的快速免疫检测方法中. 在免疫层析快速诊断技术中常用于β- HCG 的特异性免疫诊断早孕检测等,具有
快速、准确和无污染等优点。
关键词:胶体金免疫层析法双抗体夹心早孕检测
中图分类号:R446. 61 文献标识码:B 文章编号:1003 - 6245 (2006) 12 - 0928 - 02
人类绒毛膜促性腺激素( HCG) ,是合体滋养细 2 基本原理
胞分泌的一种糖蛋白激素,由与 FSH 、L H 具有同源双抗体夹心:阳性样品通过层析作用与红色或
性的α亚基和特异性β亚基组成,约在受精后第 6 紫色(视标记浓度而定) 金标发生免疫反应,在层析
天开始分泌,停经 60 - 70 天时达高峰。通过检测尿作用下向上泳动,把金标通过 HCG 桥连到 T 线上,
液或血清中的特异性β- HCG 可以协助诊断早孕, 形成“胶体金标记的抗β- HCG 抗体- HCG - 抗α
也可辅助诊断妊娠相关疾病如异位妊娠、滋养细胞- HCG”双抗体夹心复合物,由于该复合物直径大
疾病等。于 NC 膜的孔径而在 T 线位置沉积,达到一定量金
胶体金免疫层析法常用于早孕的快速诊断:妊标显色有肉眼可见水平。多余的金标继续泳动到 C
娠“指示剂”HCG 抗原通过免疫层析与相应抗α- 线位置,由于多抗鼠与鼠源性单抗反应桥连金标显
HCG 抗体及胶体金标记的抗β- HCG 抗体桥连形色。阴性样品因无 HCG 不能桥连金标与 T 线,只
成双抗体夹心复合物,复合物达到一定的量可以显有 C 线显色.
色。人们据此制成了早孕诊断试纸. 这种方法检测 3 结果判读
速度快,3 - 5 分钟出结果;灵敏度高,可达 25U/ L ; β- HCG 的特异性、标记浓度、温度、P H 、NC
好的试纸条准确度达 95 %以上。本文以常见的早膜的孔径大小等都直接影响试纸特异性以及灵敏
孕试纸为例简单介绍有关知识。
度,判断结果时需结合临床。
1 试纸构成
无 C 线产品无效或使用不当。
1. 1 材料:粘性材料、硝酸纤维素膜(NC 膜) 、玻璃
无 T 线提示未怀孕,因 HCG 试纸常存在高浓
纤维( P H8 - 10) 、鼠源性抗α- HCG 抗体(简称鼠
度钩状效应,在浓度超过一定值时 T 线变弱甚至表
多抗) 、干的胶体金标记鼠源性抗β- HCG 聚酯膜
现为阴性,需排除漏诊。
(简称金标) 、硬质吸水滤纸、1. 2. 装配方法:在粘性
C 线、T 线早孕,颜色深浅与 HCG 浓度有关;
材料上粘上 NC 膜,将鼠多抗固定于 NC 膜上。NC
HCG - α亚基特异性差, 阳性时应该排除 FSH 、
膜上方粘吸水