血糖浓度测定.ppt

血糖浓度测定
实验目的
1．学****用葡萄糖氧化酶法测定
血糖浓度的原理和方法。
2．掌握分光光度计的原理和操作。
实验原理
本实验用GOD-POD试剂盒测定血糖，其原理为：葡萄糖氧化酶（glucose o血糖浓度测定
实验目的
1．学****用葡萄糖氧化酶法测定
血糖浓度的原理和方法。
2．掌握分光光度计的原理和操作。
实验原理
本实验用GOD-POD试剂盒测定血糖，其原理为：葡萄糖氧化酶（glucose oxidase，GOD）利用氧和水将血清中葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生过氧化氢。
葡萄糖 + O2 + H2O 　 葡萄糖酸 + H2O2
GOD
过氧化物酶（peroxidase，POD）将H2O2分解为水和氧，产生的氧使4 - 氨基安替比林和酚缩合为红色醌类化合物:
红色的深浅与[G]成正比,可用比色法测定样品和标准G溶液的A值,计算出样品的G mmol/L。
H2O2
+
苯酚
+
4 - 氨基安替比林
POD
醌类化合物
(红色)
+
H2O
实验步骤
（一）动物准备及取血：
取饥饿16小时正常家兔一只（2 kg ~ 3 kg） ，以耳缘静脉取血，先仔细剪去放血部位耳毛，勿剪破皮肤，用湿棉球反复拭净耳部，再用二甲苯擦拭兔耳朵皮肤，使其血管充血，再用棉球擦干，在放血部位涂一薄层凡士林，再用三菱针刺破耳沿静脉放血，取完后用干棉球压迫血管止血。分离血清。
（二）测定血糖浓度
1．取试管4支，按下表操作：
试剂
空白管
测定管
标准管
血清 （μl）
－
10
－
葡萄糖标准应用液（μl）
－
－
10
蒸馏水（μl）
10
－
－
酶酚混合试剂（ml）



混匀各管，放37℃水浴中保温15min，取出冷却,在波长505nm以空白管调零读取标准管和测定管光吸收值。
血糖(mmol/L)= ×标准管浓度
测定管吸光度
标准管吸光度
正常参考值：
-
2. 计算
分生理性或病理性升高和降低1．生理性或暂时性高血糖：
餐后1～2h、注射葡萄糖、输葡萄糖液后、情绪紧张时。2．生理性或暂时性低血糖：
运动后、饥饿时、注射胰岛素后、妊娠、哺乳期、服降糖药后。
临床意义
3．病理性高血糖：
(1)糖尿病：因胰岛素分泌不足。-11mmol／L(130-200mg／dl)时可疑为糖尿病；当血糖水平超过11mmol／L(200mg／dl)时可诊断为糖尿病。(2)使血糖升高的激素分泌增加：
如垂体前叶机能亢进、肾上腺皮
质机能亢进、甲亢,嗜铬细胞瘤等
感谢导师们的倾听
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