组织切片石蜡切片过程.docx

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石蜡切片过程
石蜡包埋:
1. 脱水：组织水洗后便可酒精脱水，70%—80%—90%—95%: .
石蜡切片过程
石蜡包埋:
1. 脱水：组织水洗后便可酒精脱水，70%—80%—90%—95%—
100%酒精（无水乙醇）—100%酒精，各级酒精脱水时间30-45min。
2. （注意：80%酒精内组织可留之较久，当天如果来不及做完就可以暂时保存一晚上，次日再继续做下去。70%的酒精可作为更久的保存剂。）透蜡：脱水后组织：50%酒精+50%二甲苯30-45min.
二甲苯（组织透明即可停止）15min.
50%二甲苯+50%石蜡20-30min.
纯石蜡145min.
纯石蜡245min.
（透腊之前做好准备工作：准备腊杯，烘箱温度保持55—60C左右，使石腊
3. 熔化，温度不宜过高，以免使组织发脆。）包埋：
a. 折好纸盒，准备小镊子、酒精灯、解剖针、冷水等。
用温热吸管吸取石蜡注入纸盒。等待底稍微凝固，温镊子夹住样品放入盒子中央，面朝底（可以将蜡一次倒入纸盒，然后待蜡表面起膜后，用温镊子夹住样品放入蜡中，待冷却即可，整个操作过程中，切勿让蜡中起气泡）。
b. 两手拿着两端，入冷水一半，吹气，使表面石蜡形成移较厚腊层，然后急速全部进入冷水中3分钟。
c. 修正蜡块（上下两个面一定要平行并且光滑）固着蜡块
1. 二、切片切片（切片时，可以在刀片以及刀片周围涂上一点甘油）贴片烤片（甘油蛋白=1/2甘油+1/2鸡蛋清）（在贴片时，用细吸管取一点点甘油蛋白（越少越好）于载玻片上，然后用手抹匀，手一定要干净。将切片放在载玻片（光亮面朝向下），然后滴几滴冷水使切片悬于水上。接着将载玻片放在37C上烘烤。
常见问题分析：
1. 切片分离不能形成蜡带：?室温过低，蜡过硬。
2. 蜡带弯曲：?蜡块口下面不平行，或蜡块不与刀刃平行所致。
3. 切片厚薄不一:?切片刀或蜡块未固定紧。
4. 切成片后，组织与蜡块脱离：?脱水不干净等。
5. 蜡片易粘在切片上或蜡片萎缩：?室温太高或蜡太软或刀的角度太小。
6. 切片破裂：?浸蜡不足或浸蜡温度过高，或在脱水剂、透明剂中时间过长，引起组织发脆或有杂质，材料脱钙不完全，此种无法补救。
7. 蜡片上卷，切过刀口即破裂：?刀口太钝或沾有石蜡或刀的角度过大或蜡太硬。
*：包埋时，时间长会使标本变质，过短则石蜡不能透进标本。石蜡包埋过程中，注意控制温度保持