植物组织培养实验室.ppt

第一章 植物组织培养实验室及基本设备
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第一节 植物组织培养实验室
植物植物组织培养是以植物组织和细胞的离体无菌操作为基础的实验性学科，它需要在一定的实验条件和特定的实验环境下完成一系列操作，以无菌条件为重少人体从外界带入的尘埃等污染物。人员在此换上工作服、拖鞋、口罩，才能进入无菌室和培养室。
要求：3-5平方米，在准备室外或无菌操作室外，应保持清洁无菌；备有鞋架和衣帽挂钩。
设备：1-2盏紫外灯对衣物进行灭菌、灭菌工作服、拖鞋、口罩。
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（二）辅助实验室
根据研究或生产的需要而配套设置的专门实验室，主要用于细胞学观察和生理生化分析等。
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1、细胞学实验室
功能：对培养材料进行细胞学鉴定和研究， 分为制片室和显微观察室。
制片是获取显微观察数据的基础，制片室配备有切片机、磨刀机、温箱及样品处理和切片染色设备，通风橱和废液处理设施。
显微观察室主要有显微镜和图像拍摄、处理设备。
要求：明亮、清洁、干燥、防止潮湿和灰尘污染。
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2、生化分析实验室
培养细胞产物为主要目的实验室，应建立相应的分析化验实验室，随时对培养物成分进行取样检查。大型次生代谢物生产，还需有效分离实验室。
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第二节 仪器设备和器皿用具
一、基本设备配置
（一）常规设备
1、天平
植物组织培养实验室需要不同精度的天平。
（分析天平）（电子天平）用于称量微量元素和一些较高精确度的实验用品。
，用于大量元素母液配制和一些用量较大的药品的称量。
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2、冰箱
各种维生素和激素类药品以及培养基母液均需低温报存，某些试验还需植物材料进行低温处理，普通冰箱即可。
3、酸度计
用于测定培养基及其它溶液的pH，一般要求可测定pH范围1-14之间，。
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PHS-802中文台式酸度计
通用型或经济型酸度计
全温型恒温培养摇床
多振幅高速轨道摇床
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4、离心机
用于细胞、原生质体等活细胞分离，亦用于培养细胞的细胞器、核酸以及蛋白质的分离提取。根据分离物质不同配置不同类型的离心机。
细胞、原生质体等活细胞的分离用低速离心机；核酸、蛋白质分离用高速冷冻离心机；规模化生产次生产物，还需选择大型离心分离系统。
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5、加热器
用于培养基的配制。研究性实验室一般选用带磁力搅拌功能的加热器，规模化大型实验室用大功率加热和电动搅拌系统。
6、其它
纯水器、分装设备
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不锈钢蒸馏水器（单蒸水）
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（二）灭菌设备
维持相对的无菌环境是植物组织培养实验室的基本要求。
1、高压灭菌锅
用于培养基、玻璃器皿以及其它可高温灭菌用品的灭菌，根据规模大小有手提式、立式、卧式等不同规格。
2、干热消毒柜
用于金属工具如镊子、剪刀、解剖刀，以及玻璃器皿的灭菌。一般选用200℃左右的普通或远红外消毒柜。
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3、过滤灭菌器
用于一些酶制剂、激素以及某些维生素等不能高压灭菌试剂的灭菌，主要有真空抽滤式和注射器式。
4、紫外灯
方便经济的控制无菌环境的装置，缓冲间、接种室和培养室必备。
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（三）无菌操作设备
1、接种箱
使用较早的最简单的无菌装置，主体为玻璃箱罩、入口有袖罩，内装紫外灯和日光灯，使用时对无菌室要求较高。
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2、净化工作台
其操作台面是半开放区，具方便、操作舒适优点，通过过滤的空气连续不断吹出，，保持了较好的无菌环境。由于过滤器吸附微生物，使用一段时间后过滤网易堵塞，因此应定期更换。
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超净工作台
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（四）培养设备
指根据需要所选用的不同规格和控制精度的用于植物细胞、组织和器官培养的设施和设备。
1、培养架
目前植物组织培养实验室植株繁殖培养的通用设施。成本低、设计灵活、充分利用培养空间。一般有4-5层，层间间隔40-50cm，光照强度可根据培养植物特性来确定，一般每架上配备2-4盏日光灯。
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2、培养箱
细胞培养、原生质体培养等要求精确培养的实验，可用光照培养箱、CO2培养箱、湿度控制培养箱等培