【精品】PPT课件 实验一 DNA的琼脂糖凝胶电泳.ppt


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文档列表 文档介绍
实验一 DNA的琼脂糖凝胶电泳
指导老师:苏乔副教授
电话:84706356-606
生物科学与工程系生物化学实验教学研究室
概述
1、迁移方向
2、影响迁移率的主要因素:
(1)DNA的分子大小
(2)琼脂糖的浓度
(3)DNA的构象
(4)电场强度
生物科学与工程系生物化学实验教学研究室
3、未知DNA片段的大小计算线性双链DNA分子,其迁移距离与碱基对数目以10为底的对数值成反比
生物科学与工程系生物化学实验教学研究室
已知分子大小的DNA标准物(DNA Marker)
可根据电泳样品预计的片段大小选择使用。
生物科学与工程系生物化学实验教学研究室
4、上样缓冲液(loading buffer)的使用
(1)倍数
(2)上样量少的时候可适当补充缓冲液或ddH2O
5、常用的电泳缓冲液及其组成
生物科学与工程系生物化学实验教学研究室
技术要点及注意事项
1、使用1×TAE配胶,50mL/2块
2、煮胶要充分,减少蒸发、避免糊底,稍凉即可加入Goldview(5-10μL/100mL)
3、倒胶时要避免产生气泡
4、待胶凝固完全后再拔出梳子
5、电泳槽一定不能短路
生物科学与工程系生物化学实验教学研究室
思考题
总结本实验操作的关键环节

经典失误集锦
1、使用50×TAE配胶
2、将DNA Marker误用做loading buffer
生物科学与工程系生物化学实验教学研究室
再见!
生物科学与工程系生物化学实验教学研究室

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  • 时间2014-12-04
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