牛耳枫中芦丁的含量测定.doc

1 牛耳枫中芦丁的含量测定【摘要】目的建立牛耳枫的质量鉴测指标。方法采用薄层色谱鉴别,高效液相色谱法测定牛耳枫中芦丁的含量, 高效液相色谱条件 Hypersil 柱( mm × 250 mm , 10μl), 流动相: 甲醇-% 磷酸溶液( 35∶ 65) 。结果高效液相法测定牛耳枫中芦丁,方法重现性好,准确可靠。结论该方法可用于牛耳枫中芦丁的含量测定。【关键词】牛耳枫;芦丁;高效液相色谱;薄层色谱 1 仪器与试药 仪器高效液相色谱仪: HP1100DAD 检测器,十万分之一电子天平。 试药芦丁对照品: 中国药品生物制品检定所,批号 080-9303 ,牛耳枫:购于广州市药材公司,甲醇(色谱纯): 天津四友,硅胶 G :青岛海洋化工厂。 2 方法与结果 2 色谱条件色谱柱: 依利特 Hypersil C18 ( × 250 mm , 10μl), 流动相为甲醇-% 磷酸( 35∶ 65), 流速为 1 ml/min , 检测波长为 360 nm 。 对照品溶液的制备精密称芦丁对照品适量, 置容量瓶中, 加甲醇制成每 1 ml含 25μg 的溶液, 即得。供试品溶液的制备: 取牛耳枫药材粉末 g, 精密称定, 加入*** 50 ml, 超声 15 min , 滤过, 去弃***液, 药渣待挥干***, 药渣精密加甲醇 50 ml, 称定重量, 水浴回流 1h, 补足减失的甲醇重量, 滤过, 去弃初滤液, 续滤液作供试品。测定法: 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液 10μl, 注入色谱仪, 测定, 即得。 分离度试验吸取芦丁对照品溶液、供试品溶液按上述方法测定,见图 1、2 。结果:样品中芦丁的分离度良好。 标准曲线取芦丁对照品溶液( mg/ml ),分别进样 5μl、 10μl、 15μl、 20μl, 按试验方法项下的色谱条件测定其峰面积。以芦丁进样量(μg) 为纵坐标, 色谱峰的面积为横坐标, 绘制标准曲线, 结果表明, 芦丁在 ~ μg 的范围内, 其进样量与色谱峰面积呈良好的线性关系。回归方程:Y= + ,相关系数 r= 。 3 稳定性试验取样品按含量测定项下的色谱条件测定其峰面积, 每隔 2h测1次, 连续测 4次, 结果: 样品在 8h 内测定是稳定的, RSD=% 。 精密度试验取对照品溶液( mg/ml ), 分别等量 10μl 进样 5 次,按上述实验方法项下的色谱条件测定, RSD=% 。 重现性试验取样品一式 5份, 按含量试验项下的条件测定, 计算芦丁积分面积,结果: RSD=% 。 回收率试验取已测定含量( mg/g )的供试品约 g, 精密称定, 再精密加入 mg 芦丁