麝香银杏叶滴丸对家兔动脉粥样硬化斑块稳定性的影响.doc

1 麝香银杏叶滴丸对家兔动脉粥样硬化斑块稳定性的影响作者:王志刚沈明勤胡政力沈建平程婷婷【摘要】目的复制实验性家兔动脉粥样硬化( AS ) 斑块模型,观察麝香银杏叶滴丸对模型家兔 AS 斑块的影响。方法 40 只家兔随机分为正常对照组、模型对照组、辛伐他汀组和麝香银杏叶滴丸高、低剂量组, 正常对照组给予普通饲料, 其它实验组供给致动脉粥样硬化饲料, 喂养 45d。观察麝香银杏叶滴丸对家兔 AS 斑块的形态学影响, 测定 MMP9 , 纤维帽厚度、中心脂质面积、斑块面积和主动脉血管切面中总的斑块数、血栓数。结果麝香银杏叶滴丸能明显降低家兔动脉粥样硬化斑块纤维帽厚度与中心脂质面积比值、中心脂质面积与斑块面积比值,能够减少斑块数和血栓数的发生, 主动脉组织中的 MMP9 与蛋白含量比值亦有降低趋势。结论麝香银杏叶滴丸具有一定的稳定家兔主动脉粥样硬化斑块的作用。【关键词】麝香银杏叶滴丸动脉粥样硬化斑块稳定性 2 动脉粥样硬化斑块不稳定性与多种参与动脉粥样硬化( atherosclerosis,As ) 形成的因素有关。本文采用实验性家兔 AS 斑块模型,观察了麝香银杏叶滴丸灌胃给药后,对模型家兔 AS 斑块稳定性的影响,探讨麝香银杏叶滴丸对 AS 斑块的稳定性作用的研究。现报道如下。 1 材料 动物普通级家兔, 雄性, 体重 ~ kg, 购于金陵种兔场, 合格证号: SCXK (苏) 2002-0025 ; 动物饲养环境:本院实验动物中心,清洁级,合格证号: SYXK (苏) 2002-007 。 试药麝香银杏叶滴丸( 棕褐色干粉), 含生药材 g/g 粉,批号: 20060622 ,由江苏省中医药研究院制剂室提供。辛伐他汀 20 mg × 14 片,批号: 060301 ,宜昌长江药业有限公司。胆固醇, 含量 % , 批号: 20060729 , 淮北市创凯生化原料厂产品。胆酸钠, 含量 % ,批号: 20060620 , 淮北市创凯生化原料厂产品。丙硫氧嘧啶片 50 mg × 100 片, 批号: 0600201 ,广东华南药业有限公司产品。 3 2 方法[ 1~5] 兔动脉粥样硬化模型的制备取雄性健康家兔 40 只, 体重 ~ kg, 随机分为 5组, 每组 8只, 分别为正常对照组、模型对照组、辛伐他汀组和麝香银杏叶滴丸高、低剂量组。正常对照组给予普通饲料, 其它实验组供给致动脉粥样硬化饲料( 5% 猪油, 1% 胆固醇, 10% 蛋黄, % 胆酸钠, % 丙基硫氧嘧啶) ,每日每只 100 g ,自由饮水,连续喂养 45d。 给药途径和剂量从造模第 1 天起,按组分别给药。麝香银杏叶滴丸高剂量为 g 生药/kg (此剂量约相当于拟临床人用等效剂量的 4倍) ,低剂量为 g 生药/kg ,辛伐他汀的剂量为 mg/kg , 正常对照组和模型对照组给予等体积的消毒饮用水, 将供试药品配成相应浓度后, 灌胃给药, 各组动物给药量均为 5 ml/kg ,1次/d ,连续给药 45d。 组织的采集实验结束前 24h, 禁食不禁水, 实验当日空气栓塞处死动物, 开胸分离从升主动脉直至横膈部的主动脉段, 去除外膜的脂肪组织, 用生理盐水冲洗干净, 截取主动脉弓所在一段约 cm 血管环, 置于 10% 福尔马林液中固定, 供病理组织学检查切片使用, 以观察主动脉斑块的形 4 态学特点。余下血管速冻后于-70 ℃保存,供测定 MMP9 使用。 主动脉斑块染色将 10% 福尔马林液固定的约 cm 主动脉血管环脱水, 常规石腊包埋切片, 把主动脉血管 4 等分, 每个等分主动脉血管切面取连续的两张切片分别进行 HE 染色和 MASSON 染色。通过计算机图像分析仪进行分析, 选取 4 个等分主动脉血管切面中最大的一个斑块, 测量纤维帽厚度、中心脂质面积、斑块面积,计算纤维帽厚度/ 中心脂质面积的比值、中心脂质面积/ 斑块面积(%) 的比值; 测定四个等分主动脉血管切面中总的斑块数、血栓数。 结果统计以±s 表示, 统计学处理均采用等方差假设 t- 检验,各组结果均与模型对照组进行比较。 3 结果 麝香银杏叶滴丸对家兔主动脉粥样硬化不稳定斑块的形态学的影响 麝香银杏叶滴丸对家兔主动脉粥样硬化不稳定斑块的病理结构变化的影响病理组织学检查结果提示, 模型 5 组家兔主动脉内膜形成典型的主动脉粥样硬化斑块。 MASSON 染色可见斑块内大量胆固醇结晶和泡沫细胞, 纤维帽厚度较薄,纤维组织少,呈蓝色,有大量结缔组织增生, 部分标本可见斑块内有钙盐沉积, 显示斑块不稳定。麝