杜氏肌营养不良症.ppt

关于杜氏肌营养不良症
第一张，共二十三张，创建于2022年，星期六
杜氏肌营养不良(DMD)属于X 连锁隐性遗传病，是男性中常见的遗传性疾病。发病率约为1/3 500 活男婴，女性多为致病基因携带者，发病者罕见，且症状较轻。D 会影响DAPC 的形成，使分子桥中断，至少导致两个结果：第一，细胞膜变得更脆弱在肌肉离心性收缩的时候会被机械力破坏；第二，框架蛋白，尤其是对机械力敏感的离子通道将会失调。这就是导致疾病的发生机制。
DMD---分子遗传及突变情况
第七张，共二十三张，创建于2022年，星期六
DMD 患者约3 0 % 为自发性突变，其余的为X染色体隐性遗传。在各种类型突变中，单个或多个外显子缺失突变患者占65% － 70%；无意义或框移造成的点突变占30%，重复占5% － 15%：故DMD 突变类型主要为缺失，其特点是Xp21 上外显子缺失的不均一性。
DMD---分子遗传及突变情况
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细胞遗传学检查
生物化学检查
基因诊断
DMD---实验室诊断
第九张，共二十三张，创建于2022年，星期六
染色体检查（X ,Y）
X染色质检查 X染色质的检查可刮取口腔粘膜、***粘膜脱落上皮细胞，亦可采用绒毛或羊水中胎儿脱落细胞涂片，经硫堇或甲苯***蓝染色，在光镜下计数X染色质数目。
Y染色质检查 Y染色质检查适用于具有一个或一个以上Y染色体的个体或细胞群 。
DMD---实验室诊断
第十张，共二十三张，创建于2022年，星期六
生物化学诊断
可对血清酶和蛋白质进行定性和定量分析。血清肌酸激酶（CK）含量在血清酶学检查中最有价值。
DMD---实验室诊断
第十一张，共二十三张，创建于2022年，星期六
基因诊断
DMD---实验室诊断
第十二张，共二十三张，创建于2022年，星期六
DMD---风险估计
DMD家系图谱
DMD为XR遗传病
女性携带者中约有1/3血清肌酐正常
Ⅱ—2为携带者，核型XAXa
假设
Ⅲ-1核型为XAXa
Ⅲ-1核型为XAXA
前概率
1/2
1/2
条件概率
1/3
1
联合概率
1/2×1/3
1/2
后概率
1/4
3/4
第十三张，共二十三张，创建于2022年，星期六
产前诊断有2个时间窗口:首选10~12孕周采集绒毛;次选为15~18孕周采集羊水。选择绒毛进行产前诊断的理由有3条
:(1)防止母源污染:DMD和SMA以缺失型突变为主,母源污染将导致诊断错误,发生血性羊水时若不经培养则直接导致诊断错误,而绒毛则可通过形态检查准确挑选。
(2)早期诊断:如胎儿受累,处理比较方便(夫妇的知情选择),而且万一取材失败或分析中出现问题,还可在稍后时间取羊水;采集羊水在孕中期,万一发生血性污染则需进行羊水培养,回旋余地太小,重新取样时间上比较困难。
(3)成功率高:绒毛提取的DNA质好量多,成功率高。
产前诊断--时机
第十四张，共二十三张，创建于2022年，星期六
由于基因突变情况复杂,产前诊断前要进行先证者预分析,以确定其基因突变细节及父母基因多态性标记是否提供了杂合状态的信息,以确定在该家系中实行产前诊断的途径和策略。
首先应进行家系成员21号染色体上STR标记的分析。
该项检测具备的优点:一是检测21三体综合征,因为在二次生育时孕妇年龄普遍偏大,生育21三体综合征患儿的风险大为提高;二是判断是否有母源污染及污染程度,有时会出现“胎儿材料”完全是母源的情况;三是核对所分析的DNA材料是否存在混乱。后两点是导致产前诊断差错的主要原因。
产前诊断--策略
第十五张，共二十三张，创建于2022年，星期六
确定胎儿性别
如胎儿为男性,则应针对先证者的基因突变或多态性标记进行分析,确定胎儿是否获得突变等位基因;如为女性,则可停止基因诊断,因为女性杂合子通常不患病。
产前诊断--策略
第十六张，共二十三张，创建于2022年，星期六
多重PCR
STR-PCR
探针连接多重扩增(MLPA)
变性高效液相色谱(DHPLC)
抗肌萎缩蛋白的免疫组化
DMD--产前基因诊断方法
第十七张，共二十三张，创建于2022年，星期六
DMD是以缺失型突变占基因的突变55%~65%,主要分布5′端和中央2个缺失热点区,在对其缺失突变热点区进行基因检测时,可检出至少一半患者。
它是目前用于缺失型DMD诊断最简便最有效的方法,已成为D/BMD患者基因诊断及产前基因诊断的首选技术,而且此技术可根据检出缺失外显子是整码还是移码来判断患者的预后。
产前诊断--缺失型突变检测方法　多重PCR
第十八张，共二十三张，创建于2022年，星