鱼藤酮在帕金森病大鼠发病机制中作用.pdf

鱼藤酮在帕金森病大鼠发病机制中的作用中文摘要硕士研究生:黄丹翊导师:王涛教授华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科目的:在鱼藤酮帕金森病模型上进一步研究鱼藤酮致帕金森病的机制,是否存在蛋白酶体活性的变化、内质网应激以及姿岣噬侨┩亚饷傅暮俗N弧方法:本试验通过大鼠背部皮下注射鱼滕酮芨粗瞥雠两鹕∧P停舛ǘ哉组和试验组黑质区和海马区蛋白酶体活性。蛋白酶体活性通过其与荧光底物反应荧光强度测定;采用免疫组织化学观察对照组和试验组黑质区及海马区神经元是否存在涣姿岣噬侨┩亚饷傅暮俗N唬徊捎肦椒ㄔ趍缴瞎鄄於照组和实验组内质网应激的标记产物基因的表达。结果:笛樽楹谥是鞍酌柑种活性与对照组相比,,,..本帕金森病模型中黑质区及海马区的表达的信号强度均比对照组强。九两鹕∧P椭形捶⑾置飨缘一磷酸甘油醛脱氢酶的核转位。结论:闾偻6源笫蟮暮谥是昂B砬牡鞍酌柑宓幕钚跃兴鸷Γ渲卸黑质区的损害作用更明显。闾偻?纱碳ず谥是秃B砬窬2谥释应激。臼笛槲捶⑾一磷酸甘油醛脱氢酶的核转位参与发病过程。关键词:鱼藤酮内质网应激涣姿岣视腿┩亚饷概两鹕华中科技大学同济医学院硕二弦德畚
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前言等以及我们前期的实验均成功地通过给予大鼠鱼藤酮——线粒体复互关系等详细的发病机制仍不清楚,有待进一步挖掘。近年来有大量的实验表明合体δ芤种萍炼粗瞥雠两鹕∧P停佣隙擞闾偻Mü种拼笫蟮哪量代谢而导致帕金森病的发生。但其病理性损伤的启动、路径、参与因素及其相蛋白酶体活性的下降可能是各种病理因素导致帕金森病的核心原因。蛋白酶体功能的正常运转需要消耗大量的能量,同时,因缺氧及蛋白质堆积等原因而致的内质网应激在神经退行性变中的作用也备受关注。而涣姿岣视腿┩亚饷翘欠纸馔揪吨械墓丶钢唬階的合成密切相关。在大量凋亡神经元中发现,沙L钡南赴R频搅讼赴酥核转位时伴随其酶活性的下降及表达量的增加。因此,在上述研究的基础上我们进行了以下的实验,以进一步探讨鱼藤酮致帕金森病发生的机制。华中科技大学同济医学院硕士毕业论文
第一部分材料和方法鱼藤酮帕金森病大鼠模型蛋白酶体活性的研究病,病因至今未明。近年来的研究提示,可能有多种病理生理机制参与了的发生,其中,、维持细胞内环境稳定的作用。墓δ芤斐?梢鹂醮ズ说鞍自谏窬D降,对旷触核蛋白的分解清除能力减弱,致使后者在黑质纹状体区缓慢沉积和多闾偻E两鹕笫竽P偷闹谱籛坌源笫笏婊殖啥哉兆楹褪笛帕金森病’琍是中老年人群常见的中枢神经系统变性疾,被广泛认为在的发病机制中发挥了重要作用。裳≡裥缘厍宄婧讼赴械耐槐洹损伤和异常折叠的蛋白质,如疽淮ズ说鞍荆畇头核氐龋鸬降骺氐鞍的大量堆积,致使发生。近年来在家族性患者中确认的鲋虏』【,,捌浔嗦氲鞍拙險密切相关。不过,赑发病过程中的具体作用机制仍不清楚。推测老化、环境因素等导致的黑质一纹状体区的能量代谢障碍可使得对能量水平高度依赖的泛素一蛋白酶体系统功能下巴胺能神经元的进行性丢失,终致发生。此前,等“谟闾偻复合体种萍帕金森大鼠模型中发现泛素化蛋白的聚集,但是否存在蛋白酶体的活性改变则未见报道。因此,我们对改良的鱼藤酮帕金森大鼠模型逊⒈”牡鞍酌柑宓幕钚越辛搜芯浚悦魅菲与山鹕〉南喙匦浴锖筒牧蟇坌源笫体重S苫V锌萍即笱医学院动物中心提供。蛋白酶体的底物甃—猇—狝及购,狶—狝购于,琔。组。对照组晃醋龃恚笛樽徊捎帽巢科は伦⑸溆闾偻!<亮课痥痙,鱼藤酮在葵花油乳化液中的浓度为痥R粤刻熳⑸渎周,动物均出现躬背、行动迟缓和毛发改变作为终止时间,共收集标本只。狶于华中科技大学同济医学院硕士毕业论文
结果将实验鼠断头取脑贮存于一℃冰箱内。康牟饬糠椒ú⒏慕樱缺—,含声裂解法裂解制成匀浆,匀浆立即于胄种印H∩锨逵腍..的底物鞍酌柑宓种活活性明显下降分别达.%、.%,差异均有极显著性意义、鞍酌柑寤钚圆舛ú握誏内取出对照组和处理组,冰上解冻。每个老鼠双侧部分海马及双侧全部黑质均被取出。取出组织按逯兀禾寤于冰冻的中以超法以牛血清蛋白为标准蛋白测定蛋白浓度。取含蛋白的上清液加性、及直鹨訸—狶—狶—甐—癇—狝—5孜于。跤后,随后以拇姿崮苹撼逡河静止分钟终止反应,然后以离心∩锨加羲谟ü夥止夤舛燃,.嫌し⒐/⑸涔测量。对照组和处理组同时测量。,测量结果以均数±标准差伞纒硎荆灾运轿.。黑质区对照组和实验组蛋白酶体只钚杂攵哉兆橄啾龋笛樽榈鞍酌柑宓活性下降.%,差异有显著性意:,图。,%,,.表谥是哉兆