弥散性血管内凝血(DIC).ppt

弥散性血管内凝血(DIC)
家兔模型及机制
凝血
抗凝血

(Ⅻ因子激活开始)

(Ⅲ因子激活开始)
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。
总之,
体内凝血与抗凝血系统的动态平衡
DIC概念
DIC不是一种独立的疾病。它是一种发生在
多种疾病基础上,凝血系统被异常激活而发
生的以凝血功能失常为主要特征的系列性病
理过程.
各种病因激活凝血系统凝血酶增多
大量微血栓形成凝血因子、血小板消耗
纤溶系统激活产生纤溶酶 FDP形成
纤溶、抗凝作用增强出血、休克、器官功能障碍和
溶血性贫血等
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DIC的系列病理过程
发病机理
1. 内皮细胞损伤, 凝血、抗凝调控失调
2. 组织因子入血,激活外源性凝血系统
, 血小板被激活

(继发于凝血系统激活或致病因子直接引起)
造模原理
兔脑粉含有组织因子(或称凝血致活酶),能启动外源性凝血过程. 正常体内血液中没有组织因子,静脉注射兔脑粉后通过外源性凝血途径引起DIC.
实验目的
学****用兔脑粉浸液复制急性实验性DIC动物模型,通过本
实验所测的几项血液学实验结果,讨论急性DIC的发病机
制,初步了解急性DIC的几项血液学常规检查方法
材料

家兔、兔台、常规手术器械、25%乌拉坦溶液、双孔电热恒温水浴箱、台式离心机、721分光光度计、秒表、显微镜、号码计数器、刻度离心管(10ml)、试管、刻度吸管(2ml、5ml)、微量定量移液器、血色素吸管、毛细滴管、血球计数板配盖片、橡皮吸球、乳胶滴管、棉球和纱布,%枸橼酸钠溶液、 4%兔脑粉生理盐水浸出液(临用时配制)、饱和***化钠液、肝素、 1%硫酸鱼精蛋白液、血小板稀释液、 ***化钙溶液、P试液、K试液、5ml玻璃试管、动脉夹、动脉插管
兔脑粉浸液的制备:称取兔脑粉[实验前检测其活力,以凝血酶原时间(PT)不超过12s为宜]400mg,加人生理盐水10m1,充分搅匀后放入37℃(摄氏度)恒温水浴箱内孵育60min,每隔15min搅拌一次,然后离心(1000转/min)5min,取上清液过滤后供静脉注射用。
P试液配制:实验前称取兔脑粉200mg,加入5m1生理盐水,充分混匀后放人37°C恒温水浴箱内孵育1h,在此过程中,用玻璃棒搅拌3~4次,并颠倒混匀,然后离心(1000转/min)5min,吸取上清液,***化钙溶液,用前摇匀,作PT实验用
K试液配制:实验前将2%白陶白生理盐水悬液1份与兔脑磷脂悬液等量混合。
实验步骤与观察指标
用25%乌拉坦溶液麻醉动物后,暴露一侧颈总动脉,结扎其远心端,用动脉夹夹闭近心端,剪口后插入动脉插管,结扎,固定之,备用取血。
复制DIC模型:取4%兔脑粉生理盐水溶液,,将总量用生理盐水稀释至30m1,由耳缘静脉缓慢注入。
在注入兔脑粉浸液前15min、注入开始后15mln及45min,分别由颈总动脉取血样10ml一次,抗凝剂(%枸橼酸钠溶液)与血液之比为1:9(V/V),离心(3000转/min)15min,获得含微量血小板血浆作为大部分实验测定用。每次取血样时,采血1~2滴供血小板计数用。—,作为测定FDP用