黄曲霉毒素测定.doc

产品号:#8030
测试前请仔细阅读本说明
Veratox
黄曲霉***定量测试盒
在2—8℃冷藏—不要冻结
黄曲霉***
黄曲霉***是一种剧毒且致癌的物质，它是由黄曲霉菌和寄生曲霉菌A的某些菌株产生的。黄曲霉***有四种类型：B1，联系。
程序性的提示
K-兰底物随时可用，底物为清亮的浅兰色，如果变成了深兰，则弃去。使用时，只倒出所需量到试剂槽中，未用完的不要再倒回试剂瓶中。不使用时应盖住试剂槽，以避免光的照射。
样品制备和提取
待测样品应按公认的采样技术采集。样品应磨碎并充分混合后再提取。测试前，将样品在2～8℃存放。注：如果使用Neogen的真菌***提取盒，则按该程序进行。如果用自己的提取方法，则按以下程序进行：
如果不使用Neogen提供的溶液，则将7份ACS级甲醇与3份蒸馏水或去离子水混合配成70%的甲醇溶液。
取1份代表性样品。研磨样品至至少有75%的样品通过20目的筛子，颗粒尺寸大约相当于细的速溶咖啡。
在高速混合器中，将25克研磨过的样品与125ml 70%的甲醇混合2分钟。另一种方法是：把5克研磨过的样品加入到25ml 70%的甲醇中，然后用力摇动3分钟。
用Neogen过滤注射器或通过Whatman #1滤纸过滤出至少5ml的提取液。该滤液即为样品的待测液。
该待测液即可用于测试。
测试程序
测试前应将所有的试剂恢复至室温（18～30℃）。
对于每个样品，从箔包中取1个红色标记的混合孔和4个红色的标准控制液的混合孔，放在孔架上。
取同样数量的包被了抗体的孔。把暂不使用的孔放回到箔包中，并重新密封，以保护抗体。在带子的一端标上“1”，然后放到孔架上，将有标记的一端放在左边。不要在孔的里面和底部写标记。
在使用之前摇动试剂瓶，混合每种试剂。
从兰色标签的瓶内吸取100μl轭合物加到每个红色标记的混合孔内。弃去吸咀。
每次使用新吸咀，吸取100μl控制标准溶液和样品液按下列顺序加到红色标记的混合孔内：
0 5 15 50 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 第1条
S9 S10 S11 S12 S13 S14 S15 S16 S17 S18 S19 S20 第2条
用12道移液器吸入、排出3次使孔内溶液彻底混合，吸取100μl加到相应的包被了抗体的孔内，在平的表面上将板前后滑动确保充分混合10～20秒钟，不要溅出试剂，混合后于室温下（18～30℃）放置2分钟。弃去红色标记孔。
倒掉包被了抗体孔内的溶液。在每个孔内加满蒸馏水或去离子水，再吸出，如此重复5次，将板朝下，在吸水材料上拍击以去除所有的水滴。
从兰色试剂瓶中倒出所需量的试剂到兰色试剂槽中。
用12道移液器和新吸咀，吸取100μl底物加到每个孔内，在平的表面上将板前后滑动确保充分混合10～20秒钟。
混合后放置3分钟。倒掉剩余的底物并冲洗试剂槽。
从红色试剂瓶中倒出所需量的试剂到红色试剂槽中。
用12道移液器吸出过量的底物溶液，再吸取100μl红色终止液（Red Stop）加到每个孔内，在平的表面上将板前后滑动确保充分混合。弃去吸咀。
用干净的布擦净板底，将板置于微型孔阅读器于650nm滤光片下读数。由于气泡会影响结