斑马鱼毒性微量模型的建立及其在海洋天然产物筛选评价中的应用.pdf

谨以此论文献给我的母校中国海洋大学孔雯雯
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:么么磁,硎形氛啪。斑马鱼毒性微量模型的建立及其在矗铃锎海洋天然产物筛选评价中的应用亏吾答辩委员会成员签字:◇
学位论文作者签名:礼复雾签字日期:舢学位论文作者签名:礼堂曼独创声明学位论文版权使用授权书签字日期:加年耭日辍拢签字日期:厶年‘月本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得荩坏嬉胖蹦顾恳嫒姨拗泵鞅ǎ嚎刮乐或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ确的说明并表示谢意。导师签字:
资助基金:国家自然科学基金.;;国家教育部高等学校博士学科点专项科研基金;;
斑马鱼毒性微量模型的建立及其在海洋天然产物筛选评价要中的应用摘海洋特殊的生态环境赋予海洋生物丰富的物种多样性和化学多样性。海洋动物,特别是海绵、珊瑚等海洋无脊椎动物在激烈的生存竞争中演化形成了有效的化学防御机制,产生的各种次级代谢产物具有鱼毒、克生、抗生物污着、杀虫、抑藻、抗菌等化学生态效应,同时也是创新药物研究和开发的宝贵资源。如何有效利用海洋药用生物资源发现真正有研究开发价值的药物先导化合物,一个关键性的重要环节就是化合物的安全性评价。目前常用的哺乳动物模型难以进行大规模操作,耗时长,耗资大。而斑马鱼具有个体小、体外发育、高繁殖力、胚胎光学透明等优势,为实验操作过程提供了极大的便利,己逐步成为药物筛选评价领域的新宠儿。本研究建立了斑马鱼毒性微量模型,试图为药物发现和化学生态学研究提供双向模型。利用建立的模型,对分离白海绵、珊瑚及其共附生微生物的次级代谢产物进行了筛选,对化合物的毒性和化学生态学活性进行了评价,探讨了该模型在药物安全性评价和海洋天然产物的化学生态效应评价中应用的可行斑马鱼毒性微量模型中,利用斑马鱼∈芫眩装迳希孵化一定时间,考察待测物的毒性和活性。利用倒置显微镜观察胚胎发育至内的形态学变化,选择卵凝结、死亡、无自主运动、心率异常、延迟发育、延迟孵化、尾部畸形、脊索畸形和形体畸形等为观察指标。对所建模型的重现性、稳运用所建立的模型,对分离白海绵、珊瑚及其共附生微生物的次级代谢产物个化合物亩拘院突钚越辛松秆∑兰郏⒊醪教教至嘶衔锏墓剐Ч系。发现,在甾体类化合物中,.缩酮甾体和孕甾酮类化合物较其他类型的甾体化合物对斑马鱼胚胎发育过程有较大的影响;在倍半萜类化合物中,多数奠类倍半萜和部分没药烷型倍半萜表现出明显的毒性;在二萜化合物中,型二萜的活性普遍较低,而含呋喃环的二萜类化合物则表现出明显的毒性;在二倍半萜中,投栋胼频幕钚云毡榻系停欢嗍⑸锢丛吹牧1矫牙嗷性。定性和准确性等进行了考察。
物表现出不同的致死、亚致死和致畸的毒理学终点;部分聚酮类化合物表现出一定的毒性,含有对苯醌结构的蒽醌类化合物均显示较强的毒性。对海洋天然产物活性和毒性的筛选评价结果,验证了斑马鱼毒性微量模型的可行性和实用性。本研究建立了斑马鱼毒性微量模型,并首次将该模型运用于海洋天然产物活性和毒性的筛选与评价中。该模型为海洋天然产物研究提供了一个新的双向模型,在药物研究开发中适用于化合物的安全性评价,在海洋化学生态学的研究中,适用于海洋天然产物的化学生态效应评价。关键词:斑马鱼;微量模型;海洋天然产物;安全性评价;化学生态效应