免疫学临床应用.ppt

免疫学的临床应用
免疫诊断
免疫治疗
免疫预防
免疫学诊断
一、抗原或抗体的检测
二、淋巴细胞的测定
三、免疫学检测方法的应用
免疫学诊断
(一)抗原抗体反应的原理
免疫学诊断
一、抗原或抗体的检测
1、抗原抗体反应的特异性
(1)特异性:基于两种分子间
的结构互补性和亲和性。
(2)可逆性
(3)适宜的条件:电解质、pH、温度等
2、抗原抗体反应的可见性
抗原抗体按适当比例结合,形成肉眼可见的现象。
应用
1、利用已知抗原检测未知抗体
(1)检测病原微生物的相应抗体以辅助诊断疾病: 伤寒病、流行性乙型脑炎、AIDS病等。
(2)检测自身抗体——诊断自身免疫病:SLE、类风湿性关节炎等
2、利用已知抗体检测未知抗原
(1)鉴定病原菌:诊断疾病
(2)检测肿瘤相关抗原:检测甲胎蛋白以诊断肝癌
(3)检测血型抗原、HLA抗原:鉴定血型,亲子鉴定
(4)检测药物半抗原: 确认运动员是否服用兴奋剂
(二) 抗原或抗体的检测方法
凝集反应
沉淀反应
补体参与的抗原抗体反应
免疫标记技术
(一)凝集反应(agglutination)
颗粒性抗原(红细胞、细菌、乳胶颗粒等)与抗体特异性结合,形成肉眼可见的凝集块。
1 、直接凝集(direct agglutination)
玻片凝集、试管凝集
2、间接凝集(indirect agglutination)
可溶性抗原包被在乳胶颗粒或红细胞表面,与相应抗
体混合出现的凝集现象。
3、抗球蛋白试验(Coombs试验)
抗原与单价抗体(不完全抗体)结合不出现凝集块,再加入抗球蛋白后即形成凝集块。
用于检测抗Rh抗体以诊断新生儿溶血性贫血。
乳胶颗粒
红细胞
类风湿因子检测
妊娠试验
间接凝集
直接凝集
(二)沉淀反应(precipitation)
可溶性抗原(免疫球蛋白、细胞裂解物、组织浸液等)与相应抗体结合, 形成不溶性免疫复合物,出现不透明的沉淀物。多在半固体琼脂凝胶上进行,形成白色的沉淀。可分为单向免疫扩散试验、双向免疫扩散试验、免疫电泳、免疫比浊法等。
免疫比浊法:快速简便。用于血清IgG、IgA、IgM、补体C3、C4含量测定
(三)补体参与的抗原抗体反应
1、50 %补体溶血试验(CH50测定)
——血清总补体量测定
2、plement fixation test):检测抗原或抗体。
原理:用已知的指示系统检测试验系统是否结合补体进行诊断
试验原理?
检测系统:待测样品和已知抗原(或抗体)
指示系统:SRBC和溶血素
溶血—阴性;不溶血—阳性
补体
用标记物标记抗体或抗原进行抗原抗体反应借以提高免疫学诊断的敏感性
荧光素:异硫***酸荧光素(黄绿色荧光)、藻红蛋白、罗丹明(红色荧光)
放射性同位素: 125I、131I
酶:辣根过氧化物酶、硷性磷酸酶
免疫荧光检测法(IFA)
放射免疫检测法(RIA)
酶免疫检测法(EIA)
(四)免疫标记技术
液相(ELISA)、固相(免疫组化技术)