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该【Stepone安装培训课件 】是由【yuzonghong1】上传分享，文档一共【36】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【Stepone安装培训课件 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。定量PCR技术原理
定量PCR的数学原理
定量PCR的化学原理
仪器的维护
内容提要
平台期
线性增长期
基线期
指数增长期
平台期
线性增长期
基线期
指数增长期
PCR动力学曲线和四个阶段
线性图谱
对数图谱
基线阈值CT值[DNA]0
基线就是扩增曲线的水平部分
对数图谱
线性图谱
什么是基线?
默认阈值=基线(背景)信号标准偏差x10
什么是阈值?
扩增产物遵循理论方程:Y=X(1+E)n
Y=扩增产物,X=起始浓度,E=扩增效率,n=循环数
指数增长期
PCR扩增的数学模型
Ct值
lg[起始浓度的]
CT=-klgX0+b
标准曲线
与目标序列互补
TaqMan---水解型杂交探针
5′端标记有报告基团(Reporter,R),如FAM、VIC等
3′端标记有荧光淬灭基团(Quencher,Q)
探针完整,R所发射的荧光能量被Q基团吸收,无荧光,R与Q分开,发荧光
探针法
TaqMan作用机理
定量PCR的数学原理
定量PCR的化学原理
仪器的维护
内容提要
平台期
线性增长期
基线期
指数增长期
平台期
线性增长期
基线期
指数增长期
PCR动力学曲线和四个阶段
线性图谱
对数图谱
基线阈值CT值[DNA]0
基线就是扩增曲线的水平部分
对数图谱
线性图谱
什么是基线?
默认阈值=基线(背景)信号标准偏差x10
什么是阈值?
扩增产物遵循理论方程:Y=X(1+E)n
Y=扩增产物,X=起始浓度,E=扩增效率,n=循环数
指数增长期
PCR扩增的数学模型
Ct值
lg[起始浓度的]
CT=-klgX0+b
标准曲线
与目标序列互补
TaqMan---水解型杂交探针
5′端标记有报告基团(Reporter,R),如FAM、VIC等
3′端标记有荧光淬灭基团(Quencher,Q)
探针完整,R所发射的荧光能量被Q基团吸收,无荧光,R与Q分开,发荧光
探针法
TaqMan作用机理
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