GDNF和E2协同保护受损DA能神经细胞机制的探究.pdf

徐州医学院
硕士学位论文
GDNF和E2协同保护受损DA能神经细胞机制的研究
姓名:王萌
申请学位级别:硕士
专业:神经生物学
指导教师:高殿帅
2012-03
和协同保护受损能神经细胞机制的研究中文摘要目的有证据表明,,这种协同保护作用是通过激活胞内甂/藕磐肥迪值模疑窬透普车鞍甤是介导激活该信号通路的跨膜蛋白,但是在这个过程中甤绾尾斡氩⒎⒒悠涔δ艿纳胁清楚。鉴于能够促使甤腡位点磷酸化,所以我们提出:和协同保护受损能神经细胞的机制与甤腡位点磷酸化有关。本研究的目的即是验证之。方法本研究以体外培养的腔喟桶甇损伤后的细胞为研究对象,分别用脂质体转染基因干扰甤柿!⒐泶甤柿!.体质粒和赵靥逯柿#砩柚侍宥哉兆楹涂瞻锥哉兆椤H后在和共同作用下,利用免疫印迹检测和免疫细胞化学等方法,以细胞内甤虯的磷酸化水平为指标,鉴定甤位点的作用。随后通过免疫共沉淀、免疫印迹检测和免疫细胞化学等方法,对比转染这些质粒后细胞中胞浆内与胞膜上雌激素受体结果在与共同作用下,,两者在膜上的结合量增加,同时胞浆中的减少,,仅与甤诎ど系慕岷狭坎⒚挥忻飨栽黾樱庵中徐州医学院硕士学位论文位点点突变质粒,
同保护作用受到了抑制;在无与作用时,,过表达组甤蠩与猚诎ど系慕岷狭孔罡撸诎械慕岷狭孔钌佟介导和协同保护受损能神经细胞生物学作用的甤峭ü;多巴胺能神经细胞;神经钙粘蛋白:徐州医学院硕士学位论文结论雌激素受体
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缩略词表缩略词英文全称中文全称免疫共沉淀雌激素受体雌激素受体胶质细胞系源性神经营家族受体神经型钙粘蛋白神经细胞粘附分子霍腔喟桶磷酸盐生理盐水缓冲液帕金森病磷脂酰肌醇っ蛋白激酶姿峒〈家览敌缘鞍选择性雌激素受体调节狤多巴胺雌二醇胎牛血清养因子激酶一剂..··猚疭甂籶。
前言次发现钙粘连素家族成员,,能够调节突触的发育等【”】。在对瓹猩钊胙芯渴狈⑾【艿饺嗣窃嚼丛蕉嗟墓刈ⅲ芯勘砻魉参与了多种细胞的抗凋亡、促增殖、促分化等作用】,尤其在多巴胺能神经细胞,它能够有效地保护受损的能神经细胞并阻止其变性死亡【俊O赴庖子是可溶性物质,其激活细胞内信号通路必须由配体结合受体和信号转导受体相结合成受体复合物介导在的跨膜信号转导受体校琑的研究较为普遍。但随后的研究中,人们发现在神经系统中存在一种比的分布更为广泛的一种配体结合受体,那是一种糖基化磷酯酰基6ǖ鞍祝怀莆狦易迨芴的,其它的跨膜蛋白也能与相结合。近年来发现了¨芄唤榈糋訢苌窬赴谋;ぷ饔谩:罄矗嗣欠⑾至硪种跨膜蛋白甤唤鼍哂叙じ阶饔谩浚灿凶5夹藕诺墓δ埽霉δ茉细胞信号转导‘”衅鹱胖匾5淖饔谩—属于钙粘连素家族成员,而钙粘连素家族一直没有在中枢神经系统中被发现,后来人们在鸡胚胎的神经管【械谝等【⑾。机体内有许多种生理功能和病理过程的调控都有雌激素的参与‘浚渲写萍に也能够参与神经保护作用‘浚矣纫源贫嫉淖饔米钗O灾】。雌激素与神经营养因子和其他生长因子的相互作用,也很可能是重要的神经保护机制。但雌激徐州医学院硕士学位论文,K訰并不是信号转导中所必须能够使狢腡位点磷酸化,统计学分析证实瓹蚿—,
素在其他不同的器官或组织中则体现出不同的生物学作用,仔细研究雌激素受体可能对揭开雌激素的作用机制有很大帮助。另外,我们还需解决另一个极具严峻的问题,就是雌激素在临床长期应用后对身体带来的危害。雌激素不仅可以通过经典的基因组作用模式,还可以通过非基因组作用模式来影响细胞功能【】。非基因组作用模式中,雌激素不需要进入细胞核,在细胞膜中有许多雌激素结合受体蛋白,两者相互作用后,并通过胞内一系列的信号传递来发挥其牛物学作用。所以,雌激素受体的研究成为热点。在雌激素受体荆珽难芯拷衔9惴海随着研究的不断深入,人们发现梢越榈即萍に氐姆腔蜃樽饔浚」蹺自身没有跨膜结构域,但它可以通过自身的转录后修饰与其他蛋白质形成复合体再定位于细胞膜,从而活和甂通路㈣。因此,今后的研究方向应该从细胞和分子水平明确雌激素的作用机制,又由于许多药物无法直接进入细或减弱胞内的某些信号通路的反应,间接地发挥一些药物的作用。等细胞膜上拇嬖冢庥氡究翁庾榍捌谑酚栊サ取发现的促进甤谙赴そ岷系难芯恳恢隆能神经细胞的保护作用