TaqMan探针实时荧光定量PCR检测慢性心房颤动患者心房肌中SK2通道mRNA的表达研究.pdf

泸州医学院
硕士学位论文
TaqMan探针实时荧光定量PCR检测慢性心房颤动患者心房肌中
SK2通道mRNA的表达
姓名:白志茹
申请学位级别:硕士
专业:生理学
指导教师:杨艳
20080401
⋯英汉缩略词对照表英文缩写英文全称中文名称猘小电导钙激活钾通—狣—·
导师签名:杉事乞签字日期:矽占年』月夕泸州医学院硕士研究生泸州医学院学位论文版权使用授权书学位论文独创性声明其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。学位论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含发和所做的贡献均已在学位论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名:.签字日期:年月本人完全了解泸州医学院有关保留、使用学位论文的规定,即:泸州医学院有权保留并向有关部门或机构送交学位论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权泸州医学院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以公布学位论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存学位论文,即:泸州医学院具有学位论文的数字化制品复制权,信息网络传播权和汇编权。保密的学位论文在解密后适用本授权书。签字日期:日
探针实时荧光定籣觳饴孕房颤动患者心房肌中ǖ續谋泶铩摘要机制卜副,并为房颤的防治提供实验依据已成为可能。近年,人类心房肌中出人意料的发现存在钙激活钾电流,并确定该电流由ǖ针实时荧光定量际跫觳缡P孕脑嗖●夹孕穆苫颊吆扩增,得到目的基因湍诓位腄片段。ù炕目的:心房颤动,虺品坎橇俅渤<目焖傩穆墒常,其发病机制尚未完全清楚。随着膜片钳和分子生物学等技术在心血管疾病研究领域的广泛应用,人们在细胞和分子水平探索房颤发生和维持的琒榈。使用通道特异性阻断剂蜂毒明肽后,细胞动作电位复极期时程明显延长,提示ǖ涝诙鞯缥坏母醇诜⒒幼饔谩D壳埃泄胤坎颊心房肌组织中虮泶锼降募觳馕醇ǖ馈1臼笛椴捎肨湿性心脏病慢性房颤患者心房肌组织中ǖ纎【亚单位的表达水平,为探讨ǖ涝诜坎械淖饔锰峁┦笛橐谰荨7椒ǎ罕瓯纠醋糟州医学院附属医院体外循环手术患者常规切除的右心耳组织,患者经心脏彩超和心电图证实为风心病窦性心律或风心病慢性房颤。将标本分为窦律组和房颤组,两组间患者年龄无统计学差异。实验操作步骤为:亩橹谎杆僮R浦烈旱V校赣谩提取心房肌组织总总孀B己铣蒫利用际踅〔糠謈產’教育部重点资助项目
菌中,涂布于固体培养板上,孵育。羧∑桨迳习咨ň洌摇菌L崛≈柿#谱龀杀曜计贰质粒进行探针实时荧光嫒砑贤瓿伞=。。产物转化入感受态大肠杆定量从Γ咳砑嬷票曜记吆头匠淌健将肁蚐两组,进行探针实时荧光定量R谰荼曜记叻匠淌剑计算出样品初始模板量。菀跃曜疾頖表示,使用煅检测组间均数差异,型臣蒲б庖濉K惺萃臣圃赟进行光吸收度测量,/..之间,/..之间,浓度大于痝砻鱎的纯度及浓度在理想范围内;总电泳结果显示:醮条带清晰,无托尾;灰度比大于不明显,,相关系数均大于的标准曲线方程为..籶的标准曲线方程为:.琑。.,,差异有统计学意义。结论:颂逍姆考组织中存在虮泶铩慢性房颤患者心房肌组织中虮泶水平低于窦性心律患者,提示表达的下调可能参与房颤发生的病理过程。关键词:,坎籗通道;探针实时荧光定量.
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常,尤其多见于风湿性心脏病和冠心病,其发病率随年龄的增加而显著增心房颤动,虺品坎橇俅渤<丛拥男穆墒加。房颤不但发病率高、持续时间长,还可引起严重的并发症,如动脉栓塞、心力衰竭、脑卒中等,有较高的致残率和病死率7坎姆⑸臀持机制以及房颤的治疗已成为心血管疾病研究中的热点。有研究认为房颤的发生和维持与心房电重构,相关。饕1硐治P姆考《鞯缥皇背,和有效不应期,的显著缩短,频率适应性减退以及心房不应期离散度增加等【。现已证实心肌细胞膜上多种离子通道功能的改变是幕。绶坎倍鞯位乃醵碳捌淦德适视π韵陆涤攵鞯缥相透频缌和瞬时外向钾电流的碌髅茏饔孟喙豯㈧荒谙蛘骷氐缌乙酰胆碱敏感的钾电流密度的上调改变动作电位的时程和形态。目前,有关心肌细胞膜上离子通道功能改变的研究较多,但其与房颤发生及维持的关系仍需进一步探讨。小电导的钙激活钾通道,且恢衷诙嘀肿橹斜泶锏睦胱油ǖ溃涞ネǖ的电导值为ǖ阑钚远韵赴贑逝ǘ纫览敌裕涠久麟作为特异性阻断剂可