酒曲中产酒酵母菌的筛选及发酵能力的测定.doc

酒曲中产酒酵母菌的筛选及发酵能力的测定
一、实验目的


:酵母发酵力的测定、酵母产酒精能力的测定、及其乃酒精的能力、

二、实验原理
酵母菌多数为腐生,一般生长在含糖较高,偏酸的环境中,在通气条件下,液体培养比霉菌快。菌落于细菌相似,较大而厚,多数不透明,菌落光滑湿润粘稠,乳白色,少数干皱,边缘整齐,呈红色或粉红色,圆形、椭圆、卵形,液体培养基生长会生成沉淀或菌膜。
酒曲中含有细菌,霉菌,酵母菌等多种菌体,在菌体的分离提取中,通过对原菌的稀释,涂布,多次划线而使各种菌体得以分开,形成单菌落。通过观察菌落的形态以及在显微镜下对单菌体形态特征的观察确定酵母菌个体。
三、实验材料

恒温培养箱,高压灭菌锅,三角瓶,电炉,石棉网,水浴锅,移液管,移液管架,容量瓶,冷凝管,蒸馏烧瓶,铁架台,软管,天平,酒精计,超净工作台,试管,培养皿,接种环,玻璃棒,涂布棒,漏斗,滤纸,玻璃珠,纱布,脱脂棉,酒精灯,白瓷缸,分析天平,量筒,牛皮纸,报纸

无水乙醇,蒸馏水,葡萄糖,磷酸二氢钾,硫酸铵,豆芽,琼脂,蛋白胨,酵母浸膏,硫酸镁,***化钙。
:酒曲

豆芽汁培养基:
黄豆芽 100g; 葡萄糖 50g;琼脂 20g; 水 1000ml;PH 自然。

A g,
B g,
C g,
D g,
E g,
F *** g,
G 葡萄糖25 g,
H 蒸馏水250mL。
四、方法步骤
1、产酒酵母菌株的初选
(1)实验器材的准备与灭菌
1)清洗培养皿、锥形瓶数个,在干燥箱中干燥
2)检查并接通高压蒸汽灭菌锅,打开电源,在锅内加水,直至水位显示为高水位,设定温度为121℃,加热时间30min。
3)取出培养皿、锥形瓶,放置降温、用牛皮纸包裹放置在内锅层,加盖,并将盖上的螺栓以两两对称的方式同时旋转拧紧,防止漏气。
4)通电,,121℃,30min灭菌。
5)灭菌时间到后,切断电源,让灭菌锅内温度自然下降,当压力表的压力降至0时,打开排气阀,旋松螺旋,打开盖子,取出灭菌物品。
(2)培养基、无菌水的制备与灭菌
1)培养基的配方如下:

培养基成分
黄豆芽 100g
葡萄糖 50g
琼脂 20g
水 1000ml
PH 自然
2)配制方法
①称新鲜黄豆芽100g,置于烧杯中,再加入1000ml水,小火煮沸30min,用纱布过滤,补足失水,即制成10%豆芽汁。
②配制时,按每1000ml10%豆芽汁加入50g葡萄糖,煮沸后加入20g琼脂,继续加热融化,补足失水。
③分装、加塞、包扎,制备斜面试管。
④。
(3)倒平板:将灭菌好的培养基在无菌条件下倒入平板培养基,作为酵母菌的固体培养基备用。
(4)样品菌悬液制备
1、取样:用分析天平准确称取1g酒曲
2、制备悬液:取1g样品并用9ml无菌