乳与乳制品中亚硝酸盐的测定.doc

乳与乳制品中亚***盐的测定
亚***盐广泛存在于自然界,在乳与乳制品中都有一定的含量。现已证明,亚***盐与食品中固有的***类化合物是产生致癌物质-亚硝***的前体物质,是潜在的致癌物质,亚***盐含量过高会引起高铁蛋白症。因此,对乳与乳制品亚***盐含量的检测和控制是非常有必要的。在乳与乳制品测定亚***盐的过程中,将样品沉淀脂肪和蛋白质后,进行过滤。在滤液中加入磺***和N-1-萘基-乙二***二盐酸盐,使其显粉红色,然后用分光光度计在其最大吸收波长538nm下测定其吸光度。将测得的吸光度与亚***钠标准系列溶液的吸光度进行比较定量。 1 主要试剂和仪器
:UV-2550型紫外可见分光光度计(岛津有限公司)
:
标准亚***盐溶液:GBW(E)0802230504水中亚***盐-氮,浓度:100mg/mL,;
硫酸锌溶液:535g/L;亚铁***化钾溶液:172g/L;
盐酸-氨水缓冲溶液:~;
显色液1:盐酸:水= 450:550(V:V)盐酸溶液;
显色液2:5g/L磺***溶液;
显色液3:1g/L萘***盐酸盐溶液。
试验中所用试剂均为分析纯,所用水为去离子水。
2 试验方法

国标《GB/-1997 乳粉***盐、亚***盐的测定》中规定最大吸收波长为538nm,但在实验过程中,做光谱扫描时,最大吸收波长往往因为样品的不同而发生变化,发上红移或蓝移的现象。考虑到测定的灵敏度,应采用最大吸收波长作为入射光波长。所以,在进行定量分析之前,应先才用光谱扫描进行峰形和峰位的确认。
以表1的仪器条件,对亚***盐标准系列进行扫描,光谱图如图1。图1中曲线均比较平滑,为了消除干扰组分的吸收,采用“吸收最大,干扰最小”的原则,即所选择的测定波长处待测组分的吸收最大,但干扰组分的吸收最小;从消除非单色光引起的对郎伯比尔定律的偏离角度考虑,应选用吸收曲线比较平坦部分对应波长的光作为入射光波长。
综上所述,应选择图1中538nm作为入射光波长,与国家标准一致。
图1 标准系列吸收光谱图

标准曲线的绘制:取 6个50mL容量瓶,***,,,,,,加水至20mL,然后依次加入3mL显色液1,
,混合均匀后,静置5min,加1mL显色液3, 静置5min,用去离子水定容至刻度,、、、、、。静置5min后于538nm处,用1cm比色皿进行测定,并以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标绘制标准曲线(见图2)
图2 亚***盐标准曲线
标准曲线方程为A=-,相关系数r2=。

样品前处理
,按顺序加入25mL硫酸锌溶液,25mL亚铁***化钾溶液,40mL盐酸-氨水缓冲溶液,每加一种试剂充分混合,用去离子水定容于250mL容量瓶中,静置40min,用定性中速滤纸过滤后收集滤液。

移取20mL滤液于5