实验报告-不同因素对酶的影响.docx

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实验报告
生物化学实验(甲)
酶的基本性质实验——底物专一性剂、激活剂和抑制、最适温度
课程名称: 指导老师: 成绩:
实验名称:
实验类型: 分离鉴定实验同组学生姓名:
一、实验目的和要求(必填)
二、实验内容和原理(必填)
三、主要仪器设备(必填)
四、操作方法和实验步骤
五、实验数据记录和处理
六、实验结果与分析(必填)
七、讨论、心得
Ⅰ.酶的基本性质——底物专一性
一、实验目的和要求
1. 了解酶的专一性。2. 掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。3. 学会排除干扰因素,设计酶学实验。二、实验基本原理
酶是一种具有催化功能的蛋白质。酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性,酶催化的反应(酶促反应)要比相应的没有催化剂的反应快103-1017 倍。酶催化作用的一个重要特点是具有高度的底物专一性,即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用,对其他底物无催化反应。根据各种酶对底物的选择程度不同,它们的专一性可以分为下列几种:
。: 有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物,而不作用于任何其他物质。如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖,淀粉酶只作用于淀粉,而不作用于纤维素。,而对另一种则全无作用。如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。采用Benedict试剂检测反应产物。
Benedict试剂是碱性硫酸铜溶液,具有一定的氧化能力,能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应,生成砖红色氧化亚铜沉淀。 Na2CO3+ 2H2O 2NaOH + H2CO3 CuSO4+ 2NaOH Cu(OH)2+ Na2SO4 还原糖(—CHO or —C=O)+ 2Cu(OH)2 Cu2O (砖红色或黄色) + 2H2O + 糖的氧化产物
在分子结构上,淀粉几乎没有,而蔗糖、棉子糖全无半缩醛基,它们均无还原性,因此它们与Benedict试剂无呈色反应。淀粉被淀粉酶水解,产物为葡萄糖;蔗糖和棉子糖被蔗糖酶水解,其产物为果糖和葡萄糖,它们都为具有自由半缩醛羟基的还原糖,与Benedict试剂共热,即产生红棕色Cu2O沉淀。本实验以此颜色反应观察淀粉酶、蔗糖酶对淀粉和蔗糖的水解作用。三、实验材料与试剂
1、实验材料⑴蔗糖酶(样品Ⅳ);⑵新鲜唾液(含唾液淀粉酶);2、实验试剂⑴蔗糖酶液蔗糖酶液(样品Ⅳ)加蒸馏水适当稀释,备用;⑵唾液淀粉酶液(学生自制) ,用蒸馏水(稀释)到25ml,用棉花过滤备用。唾液稀倍数因人而异,可稀释
50~400倍,甚至更高;⑶ 5%蔗糖(.)溶液;⑷ %淀粉溶液(%NaCl);⑸ Benedict试剂;四、实验器材与仪器
, ; (37℃,100℃); ;;;。五、实验操作方法和步骤
㈠检查试剂取3支试管,按下表操作: