透射电子显微镜.ppt

透射电子显微镜
(Transmission Electron Microscope TEM)

TEM具有和光镜相似的结构系统,由电子枪产生的电子射线作为光源,由电磁透镜代替光镜中用玻璃制成的聚光镜、物镜和目镜

TEM 镜体结构相当复杂,镜筒内部要求高真空状态
第一节透射电镜结构和工作原理

一、透射电镜结构
二、透射电镜工作原理★
第二节透射电镜样品制备技术

一、超薄切片技术★
二、特殊组织样品制备
第一节透射电镜的结构和工作原理
照明系统:电子枪、会聚透镜
镜筒{成像系统:样品室、物镜、中间镜、投影镜
观察记录系统:观察室、底片室
真空系统:机械泵、油扩散泵、真空管等
辅助{电源系统:高压电源、透镜电源、调压器等
水冷系统:循环水泵等
一、透射电镜的基本结构
(一)电子束与电磁透镜

&电子束在真空中运动的速度与加速电压有关(阳极)加速电压越高,电子束的波长越短(根据光学阿贝公式原理,一台仪器的成像最高分辨率,约为它使用信息传递媒介波长的一半。电镜之所以能获得很高的成像分辨率,是由于它的电子束波长远较可见光的波长为短)
& 电磁透镜的焦距与磁场(线圈组成,当电流通过时产生磁场)强度有关,磁场越强,焦距越短,放大倍率越高
二、透射电镜的工作原理
(二)电镜图像形成
任何物质都是由原子组成的,
当均匀的电子束穿过样品时会受到
样品上信息的处理多数电子可从原
子和原子之间的空隙穿过,极少部
分电子与原子核和轨道电子发生碰
撞而形成散射电子
散射电子能力强的地方透过电子数目少
打在荧光屏上所发出的光弱,显现为暗区

散射电子能力弱的地方透过电子数目多
打在荧光屏上所发出的光强显现为亮区
样品结构不同散射电子的能力不同,结果?
第二节透射电镜样品制备技术

一、常规样品制备技术

超薄切片技术※
负染技术

二、特殊样品制备技术

电镜酶细胞化学技术
免疫电镜技术
电镜原位杂交技术等
普通光镜切片厚度约5µm左右—石蜡切片
透射电镜切片厚度在50nm左右—超薄切片
(100nm以下)

目前有关生物体的各种组织、细胞的形态结
构知识大部分是超薄切片技术所提供
一、超薄切片制备技术
取材预固定后固定
脱水浸透包埋
修块切片染色
超薄切片技术的基本操作程序
快尽量保持其生活状态,在1分钟内固定

小 1mm³的小块

轻不要牵拉、锯、挤压组织

冷 4℃保存
(一)取材