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RNA干扰的研究
摘要:RNA干扰是指由dsRNA介导的特异靶序列mRNA基因沉默的现象,自1998年发现以来,在分子生物学研究方面已取得重大进展。特别是在哺乳动物中的应用研究,构建稳定表达siRNA载体,有效筛选siRNA靶序列方面取得了突破,而且在基因功能研究,遗传病的基因治疗,胞内抗病毒免疫,机体水平应用研究方面也有了重大进展。
关键词:RNA干扰;基因沉默;靶序列;引物;发卡结构
The research of RNA interference
Henan Zhang
(07 Biological Class, Medical College of Sun-yat sen university)
Abstract:RNA interference means the phenomenon of specific mRNA gene silence caused by the interposition of dsRNA . Since discovered in 1998, RNAi has got great progress on Biology research. People have got breakthrough especially on the appliance research of mammals, the built of the stable siRNA carrier and the efficient selection of siRNA target sequence. And people also got great progress on gene function research, gene therapy of heredopathia, endocell anti-viral immunity and appliance research of body level.
Key words: RNA interference; gene silence; target sequence;prime;hairpin
RNA干扰(RNAi)真正被确定是Fire于1998年在秀丽线虫中发现了转录后的基因沉默[1],并且引起了分子生物学家和遗传学家等的很大兴趣。RNA干扰广泛存在于各种生物中包括:从真菌到植物,从无脊椎动物到哺乳类动物等几乎所有真核生物。并很快从对线虫的研究扩展到了对锥虫、果蝇、脊椎动物以及医学肿瘤[2]、微生物[3,4]、遗传病基因治疗、基因功能研究[5]等多个领域。
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最初在1990年,Jorgensen等[6]在研究怎样增多矮牵牛花的颜色时,就观察到一种当时无法解释的现象:希望通过导入紫色色素合成酶基因增加色素基因拷贝,从而得到紫色加深的矮牵牛花;但结果确是,一些矮牵牛花的紫色不但没有加深,反倒使开出的花呈部分或全部的白色。进一步的研究说明,这些导入的基因非但没得到表达,并且使矮牵牛花自身的基因表达受到了抑制。作者当时称之为共抑制(cosuppression)。
到了1994年,Cogoni[7]等发现:向链孢霉菌中转入albinol(al-l)或albino3(al-3)基因后,内源性al-1或al-3基因表达水平大大降低。当时将这种