台州市科技计划项目可行性报告.doc

台州市科技计划项目可行性报告
一、立项的背景和意义
膀胱癌是泌尿系最常见的恶性肿瘤,在我国每年有约15万的膀胱癌新发病例,而且发病率呈逐年增高之势。90 %以上是移行细胞癌(Transitional Cell Carcinoma, TCC),少数为鳞癌和腺癌。移行细胞癌患者中近30%初诊时已有肌层浸润,其余70%为浅表性膀胱癌;虽采用经尿道切除和膀胱腔内辅助治疗可获得良好效果,但复发率高达50%~70%,而且10%~15%的复发肿瘤侵及肌层,有时复发会在术后数年发生。因此,早期诊断和长期复查监测非常必要。
膀胱癌诊断和筛查的主要手段是膀胱镜下活检和尿细胞学检查。虽然膀胱镜是诊断尿路上皮癌的金标准,但是具有侵入性,且对于微小病变和原位癌不易辨认。尿脱落细胞病理学检查虽然无创伤,然而阳性率较低,尤其在检测低级别肿瘤时敏感度更低, 而且结果判断具有主观性,容易产生偏差。鉴于尿细胞学和膀胱镜检查存在的种种缺陷,尿液诊断膀胱癌一直是研究热点。
 尿液荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization ,FISH)是用荧光标记的核酸探针和中期或间期细胞DNA杂交,检测尿液脱落细胞DNA 序列及其变化的方法。膀胱癌细胞易发生非随机的染色体改变,包括结构畸变和染色体数目异常,肿瘤细胞容易脱落于尿液中。这项技术使用患者的尿液或膀胱冲洗液检测肿瘤脱落细胞,更符合诊断的无创原则。国际报道该方法灵敏度高、适合膀胱癌的早期检测和复发监测。目前我省开展此项目的医疗单位较少,本研究将通过比较脱落细胞学和FISH两种方法在检测非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌的特异性、敏感性,完善FISH实验流程,阐明并开发其临床应用价值,为本地区膀胱癌检测提供更优方法。
二、国内外研究现状和发展趋势
膀胱癌是泌尿系最常见的恶性肿瘤,在我国每年有约15万的膀胱癌新发病例,而且发病率呈逐年增高之势。由于全部尿路从肾盏、肾盂、输尿管、膀胱及前列腺和尿道均为移行上皮所覆盖,所以90 %以上是移行细胞癌(Transitional Cell Carcinoma, TCC),少数为鳞癌和腺癌。移行细胞癌患者中近30%初诊时已有肌层浸润,其余70%为浅表性膀胱癌;虽采用经尿道切除和膀胱腔内辅助治疗可获得良好效果,但复发率高达50%~70%,而且10%~15%的复发肿瘤侵及肌层,有时复发会在术后数年发生。因此,早期诊断和长期复查监测非常必要。
膀胱癌诊断和筛查的主要手段是膀胱镜下活检和尿细胞学检查。虽然膀胱镜是诊断尿路上皮癌的金标准,但是具有侵入性,且对于微小病变和原位癌不易辨认。尿脱落细胞病理学检查虽然无创伤,然而阳性率较低,仅为8 %~46 %,尤其在检测低级别肿瘤时敏感度更低, 而且结果判断具有主观性,容易产生偏差。膀胱镜和细胞学方法易受BCG及其他化疗的影响,从而出现假阳性或假阴性结果。另外,感染、结石等亦可影响细胞的形态而造成假阳性。鉴于尿细胞学和膀胱镜检查存在的种种缺陷,尿液诊断膀胱癌一直是研究热点并取得了一定的成果。
 荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization ,FISH)是用荧光标记的核酸探针和中期或间期细胞DNA杂交,检测DNA 序列及其变化的方法。具有快速、无创性、敏感度高和特异度强等优点。膀胱癌细胞易发生非随机的染色体改变,包括结构畸变和染色体数目异常。常见结构畸变染色体有3、9、1、5、11 、21 、17 ,染色体数目异常有3、9、7、10 、11 、Y、1、8、17 、15 。临床研究发现9 号染色体部分或全部丢失在膀胱肿瘤中最常见,超过50 %膀胱癌患者有此染色体改变,被认为是肿瘤发生的早期事件和关键步骤;其次是17 号染色体畸变,可能与肿瘤浸润行为有关,因为有17号染色体非整倍体的肿瘤具有更高复发率和浸润性;7号染色体畸形也常见于膀胱癌,以三倍体多见,也可有四倍体(约占38 %),它可以单独出现在膀胱癌,但更多是伴随其他染色体改变一起发生;3 约占30 % ,而且常与其他染色体的异常并存,可以有染色体移位和数量变化,与复发有关。其他染色体异常有男性膀胱癌约半数患者被发现Y染色体丢失,11 号染色体单体等。
  细胞癌变的最早事件是DNA的改变。与膀胱镜和细胞学方法相比,FISH方法直接检测DNA水平的异常,所以能更早发现癌变。膀胱镜阴性FISH阳性的术后随访病例在3~12个月中有41%~68%被确诊为膀胱癌,而双阴性的情况下只有19%在3~19个月后确诊为膀胱癌。通过荧光原位杂交分析尿脱落细胞染色体3、7、17号非整倍体和染色体9p21丢失以诊断膀胱癌,据称能达到85%的敏感度和97%的特异度。这项技术是一种快速无创的检测技术,只需要使用患者的尿液或膀胱冲洗液检测肿瘤脱落细胞