血球计数板专题复习.ppt

血细胞计数板显微镜直接计算法血球计数板的构造和使用方格网上刻有 9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用。大方格的长和宽各为 1mm ,深度为 , 即 1mm × 1mm × ,其容积为 3; 血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物数量的仪器,由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台。中间的平台较宽, 其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网。血球计数板的结构大方格中方格小方格计数 16 × 25 型: 一般取四角的四个中方格( 100 个小方格)计数 25 × 16 型: 一般计数四个角和中央的五个中方格( 80 个小方格) 的细胞数。计数室两种规格 1. 16 × 25 型的计数板将计数室放大,可见它含 16 中格,一般取四角: 1、4、 13 、 16 四个中方格( 100 个小方格)计数。细胞个数/ 1mL = 100 个小方格细胞总数/ 100 × 400 × 10000 ×稀释倍数 2. 25 × 16 型的计数板中央大方格以双线等分成 25 个中方格,每个中方格又分成 16 个小方格,供细胞计数用(见图三)。一般计数四个角和中央的五个中方格( 80 个小方格)的细胞数。细胞个数/ 1mL = 80 个小方格细胞总数/ 80 × 400 × 10000 ×稀释倍数血球计数板的使用方法步骤 。在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。若有污物,则需清洗,吹干后才能进行计数; 。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片,用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液, 滴于盖玻片边缘,让培养液自行缓缓渗入,一次性充满计数室,防止产生气泡,多余培养液可用滤纸吸去; 。稍待片刻(约 5min ),待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后,将计数板放在载物台的中央,先在低倍镜下找到计数室所在位置后,再转换高倍镜观察、计数并记录。注意事项 ,建议将试管震荡几次,目的是什么? 目的:使培养液中酵母菌分布均匀,以保证估算准确,减少误差 2 .如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当对培养液进行稀释。具体方法是: 摇匀试管,取 1mL 酵母菌培养液,加入成倍的无菌水稀释,稀释 n倍后,再用血球计数板计数,所得数值乘以稀释倍数。以每小方格内含有 4—5个酵母细胞为宜。