恶性实体瘤患者自体CIK细胞的体外扩增及初步临床应用.docx

恶性实体瘤患者自体 C IK 细胞的体外扩增及初步临床应用姓名: 李灿班级: 国贸 1101 学号: 201115 48 【摘要】目的观察恶性实体瘤患者外周血来源的细胞因子诱导杀伤细胞(CIK) 在自体血浆中的增殖特性, 回输治疗的安全性及近期疗效。方法用淋巴细胞分离液分离获取 40 例恶性实体瘤患者外周血单个核细胞, 无血清培养基中添加 rh IFN- γ、A nti-CD3mAb 和 rh IL- 2 联合诱导单个核细胞为 CIK 细胞。在培养第 13 天进行细胞计数, 通过流式细胞术检测细胞免疫表型, 并将细胞进行自体回输。结果 40 例恶性实体瘤患者回输自体 CIK 细胞后,PR6例, MR 13例, SD 9例,PD12例, 治疗总有效率为 45% , 临床获益率 % 。多数患者一般情况明显改善; 治疗后T 细胞亚群中 CD3+ 、 CD4+ 细胞及 CD4+/CD8 + 比值及 NK 细胞计数较治疗前显著升高。治疗过程中出现 8 例低热,2 例高热,未观察到其它明显的毒副作用。结论恶性实体瘤患者自体血浆扩增 CIK 细胞, 回输治疗安全有效, 且无明显的毒副作【关键词】细胞因子诱导的杀伤细胞;免疫治疗;恶性肿瘤近年对恶性肿瘤的综合治疗方案在临床上已得到广泛认同。其中, 细胞过继免疫治疗是将具有强大杀瘤活性的免疫细胞在体外扩增后回输给患者的治疗方法,已成为继手术、放疗、化疗后对肿瘤患者进行综合治疗的重要手段之一。 CIK 细胞是在体外应用多种细胞因子和 CD3m Ab 刺激诱导恶性肿瘤患者外周血单个核细胞而获取的异质细胞群, 兼有 T 细胞强大的杀瘤活性和 NK 细胞的非主要组织相容性复合物(MHC) 限制的杀瘤特点, 故又称为 NK T 样细胞。本研究通过在体外扩增 40 例恶性实体瘤患者外周血来源的 CIK 细胞,,并进行自体回输, 探索恶性实体瘤患者自体 CIK 细胞临床应用的安全性及近期疗效,为自体 CIK 细胞过继免疫治疗在临床的推广应用积累一些有益经验。 1 材料与方法 临床资料 40 例均为山东省千佛山医院 2007 年1 月至 2008 年 12 月住院的恶性实体瘤患者,所有病例均经病理或细胞学检查确诊, 分期Ⅱ~Ⅳ期。其中, 男性 22例, 女性 18例, 年龄为 34~ 74岁。大肠癌8例, 乳腺癌 8例, 肺癌 6 例, 肝癌 6例, 胃癌 4例, 肾透明细胞癌 3例, 口腔鳞癌 2例, 前列腺癌 2例, 卵巢癌1例。 Kamo fsky 评分>60 分, 预计生存期大于 3个月, 治疗前心、肝、肾功能及血常规大致正常。末次化疗时间距本次治疗间隔 1 月以上,并排除心、肺、肝、肾功能不全者及对生物制品敏感者。所有患者或家属均已签署 DC-CI K 细胞治疗知情同意书,并报医院伦理委员会批准。并接受 DC-C IK 细胞治疗。于 20 08 年2 月至 2008 年 12 月接受自体 CIK 细胞治疗共 1 疗程。 主要材料 GT-T551 无血清培养基( 日本 TA KARA BIO 公司), 鼠抗人抗 CD3 单抗( 古巴 C12MA 公司), DM EM 培养基、 Fico ll 液、 HEPES 液及 PBS 缓冲液(均为美国 SIGMA 公司) ,基因重组人干扰素γ( IFN-