伞形科3种维药材蛋白电泳的鉴别.doc

1 伞形科 3 种维药材蛋白电泳的鉴别【摘要】目的准确地鉴别伞形科果实类药材。方法应用聚丙稀酰***电泳技术,对3 种外形相似的果实类药材进行了可溶性蛋白质的电泳分析。结果电泳图谱清楚地显示出各样品的特征带, 从而能准确区别各种药材。结论该方法操作简便, 重复性好, 各样品间可比性强, 能起到准确鉴别药材的目的。【关键词】伞形科聚丙烯酰***蛋白电泳 Abstract:ObjectiveTo identify Umbelliferous fructification Gel-electrophoresis technology was used to analyze the umbeelliferous herbs. ResultsThere are differences on grades,regions and quantities among patterns of Trechyspermum ammi cyminvm L. and Cvminvm vernum L.. ConclusionThe method of Gel-electrophoresis is easy and effective for identification of umbelliferous fructification herbs. 2 Key words:Trachyspermum ammi L.; Cuminvm cyminvm L.; Polypropylene acyl amic ; Albumen electrophoresis. 伞形科药材的果实是双悬果,外形极相似且小,肉眼难以识别, 组织结构也极相似。为了鉴别真伪, 保证临床用药的安全有效, 本实验运用聚丙烯酰***凝胶电泳技术, 对伞形科 3 种果实类药材进行可溶性蛋白质的电泳分析。现报道如下。 1 器材阿育魏实及孜然与野孜然均由维吾尔医医院鉴定并提供(见表 1) 。表 1 样品来源(略) 仪器 DYY-6B 型稳压稳流电泳仪;真空干燥器; DYCz-28 A 型电泳槽; 800 型离心沉淀器; SBZ200 型超声洗脱仪; WD-9405A 型脱色摇床;微量进样器。 试剂丙烯酰***( Acr )、甲叉双丙烯酰***(Bis) 、三羧***氨基甲烷( Tris ) 、四***乙二***( TEMED ) 、盐酸、过 3 硫酸***、甘***酸、溴酚蓝、考马斯亮蓝 R250 、甲醇、醋酸。 试剂配制[ 1 ]分离胶缓冲液、分离胶贮液、过硫酸铵溶液、浓缩胶缓冲液、四***乙二***溶液、电极缓冲液、溴酚蓝指示液、染色液、脱色液。调整分离胶使 T=% , C=% 。 2 方法 样品制备[1,2] 称取阿育魏实及孜然与野孜然各 g ,加入稀释 4 倍的浓缩胶缓冲液,充分研磨成匀浆,超声提取 10 min ( 37℃, 功率 100% ); 离心 20 min (3 500 r/min ), 取上清液供点样用。 电泳操作安装好胶板, 于上下电泳槽中注入电极缓冲液;用微量进样器每孔进样 20μl ;再加 10μl 的溴酚蓝指示跟踪, 电泳开始时, 维持电流 13 mA , 待样品进入分离胶后,电流加大到 25 mA ,整个电泳