Agilent1260高效液相色谱仪操作规程.doc

1、目的
确保Agilent 1260高效液相色谱仪的正确使用及管理。
2、范围
研发分析中心实验室Agilent 1260高效液相色谱仪。
3、责任
仪器使用者对本标准的实施负责。
4、内容
4. 1 开机
,进入Windows 画面。
,待各模块自检完成后,双击电脑桌面上LC1260-1(Online)图标,化学工作站自动与1260LC通讯,进入工作站画面。
【View】菜单选择【Method and Run control】项,也可单击工作站
画面左下角【Method and Run control】项,进入方法和运行控制窗口。
安装色谱柱
正确安装实验所需的色谱柱,注意色谱柱流速箭头方向,试验过程中需检查是否存
在漏液。
溶剂瓶体积设置
把事先配好的流动相倒入相应的溶剂瓶中,单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下【Bottle filling】,在参数设置处输入各溶剂瓶(A、B、C、D)内溶液实际体积和停泵体积,单击【OK】键,即可。
设置【Seal wash】
单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下“control”, 在seal wash这栏中选择“On”, 清洗功能开始运行,并设置清洗时间,。
脱气
逆时针旋开Purge阀,单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下“control”,
在“pump”这栏中选择“On”,泵开始运行。设置“solvents”一栏中相应参数,将试验
中所用到的管道逐一脱气,直至管内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止所需时间,
3ml/min冲洗大约需5min~10 min ,,完成后选择“off”, 单击OK键关泵,顺时针旋
紧Purge阀。
平衡色谱柱
单击【instrument】菜单,选择【Set up Instrument Method】项下“Quat Pump”, 在
“solvents”一栏将试验中要用到的有机相通道(甲醇/乙***)设置为100%,并将
“Flow”从低流速逐级设为1ml/min, 在“pump”这栏中选择“On”,泵开始运行,冲
洗约10min钟后,设定与测试方法相同的柱流速和流动相比例平衡色谱柱(梯度采
用起始流动相比例),冲洗色谱柱,直至基线走平,一般需要30 min ~60 min。若
测试方法用到缓冲盐作为流动相,还需10%甲醇或乙***水溶液冲洗过渡色谱柱,
约30min,再设置为流动相得比例,平衡色谱柱。
方法编辑
进样体积设定
标准进样: 单击【instrument】菜单,选择【Set up Instrument Method】,在此窗口上方选择“Sampler”模块, 在“Injection Volume”处输入进样体积,选择“Standard Injection”方式,单击OK键即可。
带洗针进样:单击【instrument】菜单,选择【Set up Instrument Method】, 在此窗口上方选择“Sample