实验五
细菌的生化反应实验
掌握细菌鉴定中常用生化实验的原理和方法
了解细菌生化试验在细菌鉴定及诊断中的重要意义
一、实验目的
二、实验原理
不同的细菌具有不同的酶系统,对糖类和蛋白质的分解能力不同,最终形成的分解代谢产物不同。
通过对代谢产物的检测,可鉴定细菌。
吲哚试验Indol
细菌分解培养基中的色氨酸,生成吲哚,吲哚可与试剂中的对二甲氨基苯甲醛作用,生成玫瑰吲哚而呈红色
两液面接触处出现红色为阳性,无色为阴性
***红实验()
微生物进行混合酸发酵,产生各种有机酸——pH下降——加入指示剂***红——红色
菌种:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、未知菌斜面
培养基:葡萄糖发酵培养基试管、乳糖发酵培养基试管、
蛋白胨水培养基、葡萄糖蛋白胨水培养基、
明胶发酵培养基等。
试剂:大肠杆菌IMViC鉴定管、金黄色葡萄球菌生化鉴定管、
***红指示剂、40%KOH、5%α-萘酚、***、吲哚试剂等
其他材料:试管架、酒精灯、接种环等
三、实验材料
(一)糖发酵试验
1. 用记号笔在各试管上标明发酵培养基名称和所接种的细菌
取葡萄糖发酵培养基管3支,分别接种大肠杆菌、未知菌,第三支不接种,作为对照。另取3支乳糖发酵培养基,作同样的操作。
3. 37℃,24-48h。
4. 观察颜色变化及有无气体产生。
三、实验步骤
结果:
将结果填入下表,“”表示产酸或产气;“+”表示产酸不产气,“-”表示不产酸不产气。
糖类发酵
大肠杆菌
未知菌
对照
葡萄糖发酵
乳糖发酵
OF :Oxidize and ferment
氧化发酵实验
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