甜瓜主要病原菌的鉴定与抗病基因的分子定位.doc

分类号:S 单位代码:10749
密级: 学号:02040326
宁夏大学
硕士学位论文
题目
english
研究生: 哈矿武
指导教师: 刘萍教授
申请学位门类级别: 农学硕士
专业名称: 作物育种
研究方向: 蔬菜育种新技术
所在学院: 农学院
二零零八年四月
Ningxia University
Thesis for Application of Master Degree
Study on Drought-tolerance at Stage of Germination and Seedling of 14 Varieties of Tall Fescue under PEG-6000 Stress
Graduate student:Wang Bin
Director:Prof. Xie Yingzhong
Specialty:Grassland Ecology,Resources and Environment
Major:Prataculture Science
Finish Date:April 2008
独创性声明
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导师签名: 时间: 年月日
甜瓜主要病原菌的鉴定与抗病基因的分子定位
摘要
甜瓜(Cucumis melo L.)是深受世界各地人民喜爱的一种高档瓜果之一。在整个生育时期中遭到多种病虫害的侵袭。随着经济的发展和人民生活的提高,近年来,甜瓜栽培面积,尤其是保护地栽培取得了长足的发展,然而,在甜瓜生产蓬勃发展的势头中,还存在许多问题。连作重茬是影响甜瓜生产可持续发展的重要问题之一。由于连作重茬造成土传病害加剧,影响了果品产量与品质的提高。筛选抗源、培育和推广抗病品种是防治甜瓜病害最经济有效的措施。本文针对甜瓜主要病害(蔓枯病、枯萎病和白粉病),展开病原与抗源鉴定、抗源抗性遗传分析以及抗病基因的分子定位研究,取得结果如下:
,成功分离、纯化和鉴定了甜瓜蔓枯病、枯萎病病原,鉴定结果表明甜瓜蔓枯病(Didymella bryoniae (Auersw.) Rehm)属半知菌亚门,球壳孢目,壳二孢属;甜瓜枯萎病病原菌为尖袍镰刀菌( . sp . melonis)。经致病性测定及再分离研究,病原菌的形态特征与前人的研究结果一致。
,难以产生分生孢子,即使在易产孢的燕麦或玉米培养基上,产生的分生孢子也极少。为了高效诱导分生孢子,采用逆境胁迫的方法,结果表明在PSA平板上生长茂盛的蔓枯病菌丝体紫外照射2和4min效果较好,15d后各处理均产生较多的分生孢子器;热激处理效果更好,35℃各处理均产生大量的分生孢子器,但处理1d和2d的相对较好;40℃各处理均产生分生孢子器,但处理2d、3d和4d的相对较好;45℃各处理均产生大量的分生孢子器,处理1d、2d、3d的相对较好。说明适宜的热激条件可有效诱导分生孢子器的产生。将分生孢子器接种在燕麦培养基上短期内能快速扩繁分生孢子器。甜瓜枯萎病病菌的分生孢子采用PD培养液振荡诱导。
,结果表明提取的DNA中RNA消化彻底,稀释100倍DNA浓度达30ng/ul左右,直接用于Fom2——SCAR标记反应体系的PCR扩增。
——SCAR标记鉴定技术,从92份中国香瓜种质资源中发掘了63份抗源;采用上胚轴针刺接种方法从100份中国香瓜种质资源中筛选出了11份蔓枯病抗源,其中包括2份高抗抗源。
、F1、BCs和BCr为材料,利用叶片离体接种鉴定技术,
分析了抗源4G21的抗性遗传规律,结果表明:F1抗性水平低于抗病亲本,表明抗病基因在F1表现为部分显性。BCs抗感分离比为1∶1,F3家系抗感分离比为3∶1,经χ2测验均达到了显著水平。