亲环素A蛋白在胰腺癌组织中的表达及其临床意义.doc

亲环素A蛋白在胰腺癌组织中的表达及其临床意义.doc亲环素A蛋白在胰腺癌组织中的表达及其临床意义
作者:严京哲刘慧峰王伟明池沼丞
【关键词】胰腺癌;亲环素A;淋巴结转移;免疫组化
亲环素A(Cyclophilin A,CypA)是免疫抑制剂环孢素A(Cyclosporin A,CsA)在细胞内的作用靶点,具有肽基脯氨酸顺/反异构酶(Peptidylprolyl cistransisomerase, PPIase)活性。最近研究示Cyp A蛋白在非小细胞肺癌〔1〕、前列腺癌细胞〔2〕、直肠癌〔3〕、喉癌〔4〕、食管癌〔5〕等肿瘤组织中高表达。另有研究报道CypA表达与子宫内膜癌预后密切相关〔6〕。胰腺癌起病隐匿,其术后5年生存率低于5%〔7〕。本研究拟探讨CypA蛋白在胰腺癌中的表达同肿瘤临床病理特征之间的关系。
1 材料和方法
材料
34例胰腺癌标本来自本院病理科2002~2008年存档病理蜡块,均经病理证实:高分化腺癌15例,中分化腺癌12例,低分化腺癌7例。其中男20例,女14例。年龄31~76岁,,按1991年连续切片。所有病例术前均未行放、化疗。
方法
兔抗CypA多克隆抗体ab41684 (Ab, US),ABC免疫组化染色试剂盒(Vectastain ABC kit, Vector Labs)、DAB显色试剂盒(Vector Labs)。操作步骤按试剂盒说明书。用随试剂赠送的阳性片作为阳性对照,以PBS替代一抗作为阴性对照。常规苏木素轻度复染。
结果判定
以细胞有浅黄色、棕色、棕褐色颗粒为阳性细胞;阳性染色细胞条件为细胞结构清晰、阳性颗粒定位好、着色与背景对比清晰。根据染色的强度和范围进行结果评定,用半定量积分法将染色强度分为0~3分:0(未染色)、1(弱)、2(中度)、3(强):根据染色细胞占计数总细胞的比例将染色范围分为0~3分:0(0%),1(<25%),2(25%~50%),3(>50%),染色强度和范围得分之和作为CypA染色的最后得分。0分为(-),1~2分为(+),3~4分为(),5~6分为()。将评分值小于或等于2分定为阴性病例,大于2分定为阳性病例。
统计学处理
,CypA评分及与各临床指标的关系两组间比较采用方差齐性检验(t检验),三组或三组以上两两比较采用方差分析(q检验)。
2 结果
CypA蛋白表达免疫组织化学检测结果
CypA在胰腺癌组织中表达较强(图1)。阳性染色主要定位于癌细胞胞质,呈棕黄色或棕褐色,染色均匀一致。正常胰腺组织也可见到CypA阳性表达,但颜色普遍较浅,呈浅黄色。
CypA在胰腺癌及正常胰腺组织中的表达及与各临床指标的关系
% (26/34)及评分值明显高于正常组织〔%(2/10)〕(P<)。在胰腺癌各病理分级组之间差别不显著(P>)。淋巴结转移组的CypA表达明显高于淋巴结未转移组(P<)(表1)。表1 CypA的表达与各临床指标的关系(略)
3 讨论
CypA是一种能激活内皮细胞的前炎性因子,还可作为一种氧化应激诱导分泌的生长因子,并且参与细胞内胆固醇转运复合物形成。从以往研究结