实验四肉制品中亚***盐含量的测定
——重氮化偶合比色法
实验目的
掌握肉制品中亚***盐含量的测定方法和卫生评定。
二、实验原理
亚***盐在酸性溶液中与格氏试剂中的对氨基苯磺酸重氮化作用,生成的重氮化合物与α—萘***发生偶合反应,生成紫红色的偶氮化合物。颜色的深浅与亚***盐含量成正比,故可以其显色度与已知量的亚***盐标准溶液比较定量。
三、器材与试剂
分光光度计、纳氏比色管;
饱和升***溶液;格氏试剂;亚***盐标准使用液(2μg/mL);盐酸
四、操作方法
1、样液的制备
,置于250mL烧杯中,加100mL水,混匀,加热至约80℃,移入250mL容量瓶中,用水数次洗涤烧杯,洗液注入容量瓶中,加水至容量瓶的2/3容积,置沸水浴中加热1h,不时振摇,然后加5mL饱和升***溶液,冷却,再加水至刻度,混匀,过滤,滤液备用。
2、测定
取6支清洁干燥的50mL纳氏比色管,编号后5个标准管中分别加入0、1、2、3、4mL亚***钠标准使用液(相当于0、2、4、6、8μg亚***钠),样品管中加入5mL上述滤液,各管均加水至50mL刻度处混匀。然后分别加入2滴盐酸溶液和2mL格氏试剂,混匀,37℃加热20 min,用1㎝石英比色杯,以零管调节零点,于波长525nm处测吸光度,绘制标准曲线比较。
编号
成分
标准管
样品管
0
1
2
3
4
5
2μg/mL亚***盐标准使用液(mL)
0
1
2
3
4
/
样品滤液(mL)
/
/
/
/
/
5
相当于亚***盐含量(μg/mL)
0
2
4
6
8
A1
(加水至50mL刻度处,混匀)
盐酸(滴)
2
2
2
2
2
2
格氏试剂(mL)
2
2
2
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