肝细胞癌病人血浆循环DNA浓度及其分子遗传学异常的临床意义研究.pdf

复旦大学
博士学位论文
肝细胞癌病人血浆循环DNA浓度及其分子遗传学异常的临床意义
研究
姓名:任宁
申请学位级别:博士
专业:外科学
指导教师:汤钊猷
20040430
。蒯循环锌杉觳獾接朐⒅琢鱿赴嘁恢碌姆肿右糯卣鳎4耍庵苎与∪说淖R聘捶⒚芮邢喙亍5裆形醇泄匮=稤定量检测细胞株在染色体上有个表达序列标记川一癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,年代以来已成为我国第二位癌症杀手。尽管近年肝癌的临床治疗取得了很大的进展,部分早期诊断并得到及时治疗的病人获得了羝谏妫ǜ伟┎∪俗艿脑ず笕匀徊焕硐搿F渲饕T蚴予术切除后仍有相当比例的病人发生肝内复发或远处转移。常规组织学指标难以准确预测转移复发及病人预后。因此,临床上迫切需要一些生物学标志物副能预测肝癌病人转移复发的可能,以利于肿瘤方案的个体化和及时有效的辅助治疗,以进一步延长病人生存。组织学肿瘤标志物存在标本采集、无法连续检测和随访追踪等诸多限制,而体液饕J峭庵苎肿瘤标志物具有检测方便和非侵入性等优点。已发现肿瘤病人外周血循环暮吭黾樱橛凶R频闹琢霾∪烁哂谠缙诓∪耍以循环姆肿右糯Ъ觳庵鸾ケ蝗嗣撬厥印有关肝细胞肝癌∪搜=稤的研究较少。我所牛旗等在病人的血浆循环屑觳獾奖蝗衔6匀橄侔┳R聘捶⒂性げ饧壑档腄在锒现械挠τ眉壑怠⒀=稤定量及其遗传学异常,包括等位基珹、单核营酸多态性检测琒等,在R聘捶⒃げ夂驮ず蠹嗖獾确矫嬗τ玫谋ǖ馈我所前期工作发现,染色体缺失和淖R朴泄亍@梦⑽佬潜昙侨基因组扫描进行等位基因失衡分析发现整个染色体存在不同程度的缺失,尤心个微俏坏鉇钠德首罡摺N庑赖韧ü齟⒄罅斜冉戏⑾指伟└咦R,泶锵和两个微卫星标志的杂台性缺失⑷,
第一部分肝细胞癌病人血浆循环亩糠治及其临床意义肝细胞癌病人血浆循环ǘ燃捌浞肿右糯б斐5牧俅惨庖逖芯渴扬砸在卜述基础上,本研究旨在评价血浆循环ǘ纫约把=稤中本部分工作的目的是探讨血浆循环糠治鲈贖诊断及转移复珹糜谂卸涎=珼浓度作为诊断标准的可行性。并进一步分析橹湮尴灾圆钜T贖组中,┱锒稀⒆R聘捶⒃测以及预后判断中的价值。采集例术前肝功能正常的∪恕テ诟斡不∪艘约幢壤∈筒⒊浞只煸群笸ü贤庥肟杉獬上穹治鱿低扯俊J苁哉正作特征曲线了血浆ǘ扔際病人临床病理特征及预后的关系。发现:∪撕透斡不∪说难=稤浓度./詀高于健康人群血浆循环ǘ..统计学上有显著性;5牵斡不檠=稤浓度与的例病人的血浆循环ǘ./高于无肝内播散灶或脉/,2捎/】等巳貉=环ǘ鹊木倍标准差魑U锒螲的临界值,%,∪酥琢鲋本冻渊,能与肝癌细胞的转移潜能有关。初步研究发现其中一个杂Φ腍雄因可能是一个抑制肝癌转移的候选基因。发和预后评估中的应用价值。健康志愿者的静脉血,抽提血浆循环==稤与荧光染料琑扒呦旅婊/钜煸管癌栓的例病人./,,篍。
手蝴要第二部分肝细胞癌病人血浆循环腥旧等位基因失衡及其临床意义也明碌低于组ィ琾.。但血浆循环ǘ扔際期为期,多于ィ琾.。组的晡蘖錾媛刚性与否、有无肝硬化、肿瘤数目、有无肿瘤包膜、旨逗脱G錋浓度等无明显关系。多因素分析显示血浆循环ǘ仁荋病人的独立提示:血浆循环ǘ炔皇钦锒螲的理想指标,但可作为ず本部分研究的目的是分析血浆循环腥旧细伟┳R葡喙鼗的等位基因失衡与∪俗R聘捶⒓霸ず蟮墓叵怠选择染色体上、和三个微卫星标记对例病人的血浆循环⑾嘤Φ闹琢龊臀蘖龈巫橹疍,以及例代偿期肝硬化病人和例健康志愿者的血浆循环蠥治觥发现:例代偿期肝硬化病人和例健康志愿者的血浆循环谌位点上均未测及。在例∪搜=胫琢鲎橹瓯局校%的病例至少在血浆或组织锌杉觳獾揭桓鑫坏愕腁F渲蠨和各位点的在血浆循环械姆⑸史直鹞甇%、./谙嘤χ琢鲎橹疍中分别为./.%,,%,/%,/俊Q=稤中位点的与旨.、制闐..:霞觳馊旧螪坏愕任换蚴Ш夂脱=飨愿哂贚%,橹サ牟∪酥琢鯰分叫显低于组ィ琾.。组的曜芴迳媛的预测指标。切相关。而位点的只与荒闐.,年荚,位点的只与肿瘤数目.、制一影响因素.。/肝细胞癌病人血浆循环ǘ燃捌浞肿右糯б斐5牧俅惨庖逖芯
第三部分肝细胞癌病人血浆循环蠬基因单核苷酸多态性及其临床意义结论乒文‘描:要位点与∪烁捶位点上的狦多态性与肿瘤肝内播=稤浓度应用于锒洗嬖诒冉厦飨缘木窒扌裕皇钦锒螲提示:血浆循环任换蚴Ш夥从沉酥琢鲎橹械囊糯Ц谋洌哂较高的肿瘤特异