[优秀论文]氧化苦参碱抗肝纤维化实验研究.pdf

上海第二医科大学
博士学位论文
氧化苦参碱抗肝纤维化实验研究
姓名:贾一韬
申请学位级别:博士
专业:内科学(消化病学)
指导教师:曾民德

琂唬患觳庀窲地‰‘,并探讨了其作用机理,以为肝纤维化的防治探索新的途径。逋馐笛法分离大鼠琈比色法观察对鲋车挠跋欤⒓觳釫蛋白表达变化。.觳馇敖涸璫泶铩细胞培养:采用不连续密度梯度法结合选择***附方法分离并纯化赴S/的细菌脂多糖碳细氧化苦参碱抗肝纤维化实验研究中文摘要氧化苦参碱琌是从中药苦参、苦豆子和广豆根中提取的生物碱,具有抗炎、抗病毒、调节免疫等多种功能,临床上已用于抗肝炎病毒治疗。有研究初步证实可显著减轻造成的急/慢性肝损伤,但机理尚不清楚。/方法:/赴嘌壬ǚü鄄霴訬/赴鲋车挠响,椒ḿ觳庀赴嘌锨逡褐蠬蚉浚珽方法检测涡亲聪赴,培养:不连续密度梯度蜗赴嘌悍掷敫蜗赴蜗赴鹕四P汀法和蚅检测观察对肝细胞损伤的保护作用。胞,观察对赴鸌和泶锏挠跋臁O赴锨逡褐蠭和郊觳獠捎肊方法。庵苎5ジ龊讼赴嘌好芏忍荻壤胄姆椒ǚ掷氩⒋炕:肝纤维化大鼠。ü鄄霴訡丈腜鲋车挠跋欤目的:型胶原含量。/一
和前胶原以泶镉忻飨砸种谱饔谩型组、预防低剂量组、中剂量组、高剂量组:血清、总胆红素、白蛋白水平用全自动生化分析仪检测。血清、、、型胶原含量分别以虴方法检测。外周血馨拖赴侨汉蚇赴坑肍单色荧光法检测。肝组织钚浴含量分别用黄嘌呤氧化酶法和ḿ觳狻肝组织学检查:染色观察肝纤维化程度,三色染色观察胶原沉免疫组化:观察肝组织、型胶原、、、.杭觳飧巫橹疶和表达。一体外实验甇~/:恍坌訵笫笏婊治U6哉兆。模生理盐水预防对照组和正常处理组。低、中、高剂量组大鼠的用量分别为、、/.体重。积情况。和表达。殖。的%增殖抑制浓度在./之间。在.、胞增殖,并诱导蛲觯.、痬倍訣蛋白甇訡。诱导的大鼠肝细胞损伤有明显保护作用。检测指标:结果:甇种芁活化的合成一蚑尽ㄆな种芇鲋常./时促作用。甇氧化苦参碱抗肝纤维化实验研
肝纤维∥预防—~洽疗/氧化苦免疫写腑肝星状者施埽清纤维化指标水平的下降程度和肝纤维化逆转情况较对照组明显。防组较对照组肝功能和免疫功能明显改善,血清纤维化指标水平明显降低:し雷楦文谥使趸较灾档停组织学检查结果检测表明预防对照组大鼠肝内有大量、Ⅳ型胶原沉积,其中型和型胶原的沉积形成肝窦毛细血管化,而预防组肝内胶原沉积较少,无明显的肝窦毛细血管化形成;、、—蚇狵诙哉兆楦文谇垦粜员泶铮琌し雷楸泶锝先酰电镜学检查证明预防组肝损伤程度较对照组显著减轻。防组肝组织、.:治疗鲈率保琌瘟谱檠对诱导的大鼠肝纤维化有较强的预防和治疗作用,其机理包括多个方面,可能与保护肝细胞、抑制罨⒔档蚄细胞分泌炎性介质、促进到夂吞岣呋迕庖吖δ艿扔泄亍1狙芯刻崾狙趸嗖渭钤诟外周血单个核细胞进表达一虸8蜗宋笫驪鲋衬芰虸、表达减少,处理组大鼠的增殖能力和、表达水平高于未处理组肝纤维化大鼠。:G逖Ъ觳饨峁砻鱋表明对照组肝脏炎症和纤维化程度明显高于预防组;庖咦榛结论:纤维化的防治中可能具有广阔的应用前景。关键词胞氧化苦参碱抗肝纤维化实验研究,,,
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研究了苦参类生物碱、虸蕴逋馀嘌某上宋赴透涡亲聪赴段对肝纤维化的防治尚缺乏有效措施保绾窝罢矣行У目垢蜗宋┪镆殉年代初,国内有学者报道了苦参类生物碱的抗肝纤维化作用昀随着对其研究的深入,发现苦参类生物碱在抗肝损伤方面具有良好的药理活性,有几项报道苦参碱和氧化苦参碱琌的抗肝纤维化作用,这就日益引起人们对苦参类生物碱的重视和兴趣。苦参类生物碱广泛存在于豆科槐属植物苦参、苦豆子及广豆根中,在我国有丰富的资源。苦参类生物碱主要包括苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、槐定碱、苦豆碱等多种生物碱,它们均具有以苦参碱为代表的骨架结构,属于四环的喹嗪啶类化合物”】。在探索肝纤维化新的药物治疗过程中,我们纤维化作用好于其他苦参类生物碱和和,故把作为新的抗肝纤维化药物加以深入而全面地研究。大量证据表明歉蜗宋盓的主要来源,在肝纤维化发病机制中占有重要地位。嵌ň佑诟务糄间隙的一类非实质细胞,正常情况下是作为体内闹饕4⒋婵獯嬖冢诟髦致愿嗡鹕饲榭鱿拢琀发生活化,向肌成纤维样细胞殖并合成大