实验十 植物染色体标本的制备和观察.ppt

二实验原理
常规压片法仍是当今观察植物染色体常用的方法,其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤。但压片法的不足之处是染色体很难分散开,染色体容易变形和断裂。
去壁低渗法是借助纤维素酶和果胶酶将细胞间的果胶质和组成细胞壁的α-纤维素、半纤维素溶解掉,使植物细胞只有质膜,然后按哺乳类动物染色体标本制备的方法——低渗、火焰干燥法制备植物染色体标本。
三实验仪器、材料和试剂
1 仪器、用具:培养箱、显微镜等
2 材料:蚕豆种子
3 试剂:
⑴秋水仙素
⑵磷酸缓冲液
⑶甲醇、冰醋酸
⑷改良苯酚品红染色液
⑸混合酶液
三实验仪器、材料和试剂
3 试剂:
⑹ 70%、85%、95%乙醇
⑺ 1mol/L HCL
四实验方法(压片法制备染色体标本)
1 取材把蚕豆种子预先浸泡6小时,然后转入垫有湿润滤纸的培养皿中,置25℃温箱中发芽,幼根长至1~2cm左右,于上午13~。
2 %秋水仙素溶液中,浸泡处理4小时。
3 固定用水洗净处理过的根尖,经甲醇-冰醋酸(3∶1)固定6~24小时,再经95%、85%酒精各半小时,最后转入70%酒精中,4℃保存备用。
四实验方法(压片法制备染色体标本)
4 解离取出根尖,用蒸馏水洗净,放入1N HCl中60℃解离 8~10min,再用蒸馏水洗净。
5 染色改良苯酚品红染色液染色5~10min 。
6 压片把根尖放在载玻片上,切取分生区部分,加一滴染液,用镊子捣碎,盖上盖玻片,然后在盖玻片上放上一滤纸,用铅笔上的橡皮头轻轻敲打盖片,使细胞和染色体分散。
7 镜检。
四实验方法(去壁法制备染色体标本)
℃温箱中发芽,待根长到1~2cm时使用。
%秋水仙素溶液处理3~4小时。
,经甲醇/冰醋酸(3∶1)固定2-24小时,换入70%酒精保存。