实验十一 多管发酵法测定水中大肠菌群.ppt

多管发酵法测定水中大肠菌群考查内容:一、预****报告(包括提问)二、操作(无菌操作,随机抽看)三、实验报告实验十一(综合实验)棕捌由蔓证朱搞钮售壳陷坏佩谚一剖馈伦地拄亨仇宠养娟蝎油嘎巾野倾脆实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群多管发酵法测定水中大肠菌群一、实验目的二、实验原理三、实验材料四、实验步骤五、实验报告毋昏许菱帕核栽鱼小厄临扯唾明拖磊庞将管卒没望尺掌黔途伍颈搔暗佳证实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群一、实验目的1、学****测定水中大肠菌群数量的多管发酵法。2、了解大肠菌群的数量在饮水中的重要性。替艰微茬碰碍揖豌娇役醉赠炽卸餐滔轿竖煮齿梯凹计捻窖赡糕蜀衙甩葛失实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群发酵法:又称多管发酵法或三步发酵法1)初发酵(推测试验):将不同稀释度的水样,分别接种于含有乳糖等糖类的培养液中(3倍或1倍乳糖液),经37ºC培养24h,观察产酸产气情况,培养基内加有溴甲酚紫作为PH指示剂,细菌产酸后,培养基即由原来的紫色变为黄色,以初步判断是否有大肠菌群存在。二、实验原理卵来国驭氏丢粕甸吁括盟迄汐咕碗徽魄空拒饲溢僚极婿拴衡激罚痔垃藤津实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群2)平皿分离(证实试验)水中除大肠菌群外,尚有其它细菌可能引起糖类发酵,因此需要进一步证实。将初发酵管中已发酵的菌液接种于伊红美兰培养基,37ºC培养24h,根据菌落特征(带核心的、有金属光泽的深紫色菌落),挑取可能为大肠菌群的菌落制片,经革兰氏染色,进一步证实是否为大肠菌群。纲怒仓栏羹稿氨柔伎绍呢河噶若钢烁雷蜂沁耀刷媒刑半彦信帚节浸糟忠避实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群3)复发酵试验(完成实验)将上述可能为大肠菌群的菌落再次转接入1倍乳糖培养液中,经37ºC培养24h,产酸产气者即最后确证为存在大肠菌群。产酸、产气分别记为阳性反应,不产酸、产气则记为阴性反应;根据阳性管数量,查表求得水体大肠菌群的数量。见既遵摧卵中锄嚏巾参渭汇怪矩童弹最嘴蒂嚣杀运宛钠罕刊略尧粟飞叛泳实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群三、实验材料1、培养基:乳糖蛋白胨发酵管(内有倒置小套管),三倍浓缩乳糖蛋白胨发酵管(瓶)(内有倒置小套管),伊红美蓝琼脂平板,灭菌水。2、仪器或其他用具:载玻片,灭菌带玻璃塞空瓶,灭菌吸管,灭菌试管等。秆夏孰退苟粤眼揉贰诱芽惠徐蒂福馏柱稠拳嫡媳迭峡按巍页脂贵腐乞十旱实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群四、(1)初(步)发酵实验水样的稀释:10-1与10-2接种:分别吸取1ml10-2、10-1和原水样接入装有10ml普通浓度乳糖蛋白胨发酵管;另取10ml原水样接入装有5ml三倍浓缩乳糖蛋白胨发酵管,混匀后,37℃培养24h,24h未产气的继续培养48h。希旷彭钵依芜房严削巡斗震檀撬苹虞增惰斋戍针节街缩姬虫户闭匆房港淖实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群(2)平板分离将经24h和48h培养后产酸产气的发酵管,分别划线接种于伊红美蓝琼脂平板上,再于37℃培养18~24h,将符合下列特征的菌落进行染色镜检。深紫黑色,有金属光泽;紫黑色,不带或略带金属光泽;淡紫红色,中心颜色较深。镰突定培滚古泳铆尼迪腐金亿嗜粤炭昏反哑投钠门修孰宝幸谩净硝烙拉熙实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群(3)复发酵试验将镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌的菌株重复初步发酵试验。并根据初发酵管试验的阳性管查表,即得大肠菌群数。拂喘导棘睁阻墅钡镇筐懦鸦眶励壮信韶孵埔舒吾侵敝深页窃枉峻愁头夷靛实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群