牡蛎疱疹病毒1型检测技术规范　巢式PCR法（定稿）.doc

ICS      DB37山东省地方标准DB37/TXXXXX—XXXX     牡蛎疱疹病毒І型检测技术规范巢式PCR法Ostreidherpesvirus-1DetectionSpecification-NestedPCRXXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施山东省市场监督管理局   发布目  次前  言 II1范围 12规范性引用文件 13术语和缩略语 14试剂及仪器 25采样 、方法和保存运输 36检测 47结果 4附录 A(规范性附录)试剂及配制方法 5附录 B(资料性附录)检测目的片段的DNA序列及电泳图 7前  言本标准按照GB/—2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利,本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由山东省农业农村厅提出并监督实施。本标准由山东省渔业标准化技术委员会(鲁TC03)归口。本标准起草单位:山东农业大学、济宁滨阳生物科技股份有限公司、泰安益海生物科技有限公司、泰安智博生物科技有限公司、南京根洋生物科技有限公司、南京少伯生物科技有限公司、南京福海生物科技有限公司。本标准起草人:王雪鹏、丁雷、闫现广、王方鹏、郭志明、孙永灿、付天增、姜衡、黄金菁。牡蛎疱疹病毒І型检测技术规范巢式PCR法范围本标准规定了牡蛎疱疹病毒І型(Ostreidherpesvirus-1,OsHV-1)的巢式PCR检测方法,适用于对贝类样品进行疱疹病毒І型带毒情况的定性检测,以进行牡蛎疱疹病毒І型的流行病学调查、诊断、检疫和监测。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法SC/ 牡蛎包纳米虫病诊断规程术语和缩略语术语和定义下列术语和定义适用于本文件。牡蛎疱疹病毒І型牡蛎疱疹病毒І型属于软体动物疱疹病毒科(Malacoherpesviridae)、牡蛎疱疹病毒属(Ostreavirus),是一种双链DNA病毒,在世界范围内广泛流行,主要危害牡蛎、扇贝和魁蚶等多种双壳贝类,对贝类养殖业造成重大的损害。缩略语下列缩略语适用于本文件。bp:碱基对(basepair)dNTPs:脱氧核糖核苷三磷酸(deoxy-ribonucleosidetriphosphate)DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid)EB:溴化乙啶(ethidiumbromide)EDTA:乙二***四乙酸(etraaceticacid)PCR:聚合酶链式反应(polymerasechainreaction)Taq:水生栖热菌(thermusaquaticus)TE:Tris盐酸和EDTA缓冲液(EDTATris·HCl)Tris:三羟***氨基甲烷(trishydroxymethylaminomethane)试剂及仪器试剂除非另有说明,实验用水均为GB/T6682规定的三级水或相当纯度的水。无水乙醇: