“肝郁证”方证的代谢组学研究.doc

肝郁证方证的代谢组学研究
作者野刑缪
作者徐舒,陈合兵,李渍,张焦,蔡红兵,颜贤患,吉
志平
【摘要】目的在肝鄄证大鼠模型代谢组学研究基础上,进行谚遣
敬治疗肝鄄证大鼠模型的方证代谢细学研究,据讨迪遇髌治疗机制及
进一步明硝肚郯证的代谢组学特征。方法24只财star大鼠随机分为
造遇敬+模型组、逍道敬+宇白绝、朱型线、正常对照组,每组6只。
逍道髂+模型组和模型组采用愫性李缝的方法造朱,逍道髅+模型组和
逍逼敬+宇白组同时用途遥髋灌胍,第22天采血检测血淀皮质酮,运
用IHWIR技术对4组大鼠血清进行代谢组学分析。结果李型组大髻
第15天,22无体质量增长缓愫,
血测皮质酮存在差异P,001,浓度从高到广依次为朱型组、述道数
+襄型纫、道遢髋+空白组和正常对隆组,组间比较模型组显睫高于逍
运散+。代谢组学分析表明,4组样本闭泷
第1主成分t1方向有明显的分组差时,其中道道髂+空白组与正常
对服组之间稍有差弃,一谍遢敬+摸型组与正帷对隆组桦本的差别软
大,袋型组与正常对隆组惩本的差别最大,旦物质的变化大多昔单向
改京,结论逍道敬对肝鄄证的治疗作用在代谢物水平并非仅仁简单的
上调、下调从而中和朱型造成的代谢物变化,一可能是通过对机体的
整体调节发挥诃疗作用。通过方证整体研宁,拉出随证修模型和相应
方剂治疗后变化一改并超于正常的物质,可能较好地代表证修的代谢
练学特征,从而更适合于中医证偃研究。
【关键词】肝鄄证;代谢组学;H核磁共振;大鼠横型;方证研究
方证研究是中医证修研究的特色,以证追方,以方测证,方证之
间紧宿联系,有极强的宣观性和科学性。将方证作为一个整体去研究,
可以克服一般证候的朱精性和恒动转移性,更能有效地展示证本质。
通议观家荃一证型在眷应方药治疗前后临应症状的改普,不仅证宗寺
原证偃辩证的准确性,咖时也诱明所选方药是对证的;也船是通
过疗效这个中心环节,咖时证明方和证的科学性,这是
由中医学理论理、法、方、药的一致性和墓作觅决定的;通过方证的
整体研究从正反两个方向挖推证的科学肉浩,其同一性资化更能代表
荃一证特异性的京化。在成功建立肝鄄证大鼠模型并对关进行代
谢组学的初步研究基础上1,本课题组综而运用代谢组学方法对育
都证的方证进行整体研究,以期进一步揭示肝郯证的科学本质。
1材料与方法
,体质量
150土20g,购自南方医科大学宗验动物中心。适应性饲养14后随
机分为朱型组、正常对隆组、道遢敬+襄型组和谍遥敬+空白组共4练,
每组各6只,正常对服组3只1笼,其余3绪单笼学养。恒定温度21
士3IC,光暗周期为12h,动物自由技食及优水。逍遢敬制禅後大
平惠民和剂局方原方比例调配每剂中含柿脱12g,当归、白芸、
白术、茯荞各10g,生妄6g,灶甘荣3g,薇荽35,药物加10
借于药材量的水漫1b后,加热焕沸1h,过溱后,胡加木焊沸40
ain于80C恒温水消中泣缩成含生药量1gal,存于4C冰箱备用。
药材购于南方医院中药房,经中医药学院中药数研室鉴定为正品药材
中药牍液由南方医科大学中医药孙院中药刹剂散研宗制备。
,将模型组和
逍道髂+摸型组大鼠置于特制的李缝制动简内,通过移动播片逐步编
小大鼠的活动空间,调节到其不产生强烈反抗的最小空间。每日开威
财间随机,来缮制动1次4,持续阡间从第1天的4h迷渐塌至6
hd,连续21d。袋型组和谍遥敬+摸型组大鼠在来缝制动期闵苏食
莹水。迹遥散+摸型组和谍遥敬+空白组大鼠椿据正常成人谚遢敬每日
用量,挂佛表面积挨算成大鼠用药量为10gkg由,椿据个佛体
质量每日上午8阡给选遥髋;模型组和通遥散+空白组大鼠经胃灌相应
药量。
,造模第22天各
组大鼠用10%的木合氧醛膜腺注射,打开膜腔由腹主动脉采血约8
al,抽取的血洋室遍下靖置2h,3000rain高心共10ain,友上
游血清40C冰箱保存待格。
、反
应、排便、优食等一般情况的京化,并在第8,15,22天秒取体质量
进行比软。大鼠皮质酮酶联免疵分析试剂皿购自USONLIFECatalog
,往讽明书步命棉测4组大鼠血清皮质酮合量。所得歇探
以土s表示,
固素方差分析,LSD组闵比较,以a=

驯德编楼实验CPMG和扩散缘楼实验LED核磁共振实验,分别觅测
血清中的小分子代谢物和胸类代谢产物。对一定区间内的谱图後每殴