NF-κBp65和ICAM-1在口腔鳞状细胞癌中的表达及其意义.doc

NF-κBp65和ICAM-1在口腔鳞状细胞癌中的表达及其意义
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:李成, 漆明, 张敬, 马爱玲
【摘要】目的研究体内核转录因子NF-κBp65和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学染色法检测30例口腔鳞状细胞癌组织和10例正常成年人口腔黏膜组织的NF-κBp65蛋白及ICAM-1的表达水平。结果(1)口腔鳞状细胞癌组织中NF-κBp65蛋白和ICAM-1表达水平均较正常口腔黏膜组织增强(P<);(2)NF-κBp65蛋白表达和ICAM-1表达呈正相关(r=,P=)。结论NF-κBp65的激活导致口腔鳞状细胞癌患者体内ICAM-1表达增强,促进了机体自身细胞免疫抗肿瘤的作用,可能成为口腔鳞状细胞癌治疗的一个新靶点。
【关键词】口腔鳞状细胞癌; NF-κBp65蛋白; ICAM-1;免疫组织化学
NF-κB(nuclear factor-κB,NF-kappaB)是近年来发现的调节细胞基因转录的关键因子,参与多种相关基因转录调控,控制着细胞因子、黏附分子及生长因子等基因的表达,在肿瘤的发展过程中发挥着重要作用[1-2]。而细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecules-1,ICAM-1)参与介导细胞间的黏附、识别,对肿瘤的转化起着重要作用[3]。本研究通过测定分析口腔鳞状细胞癌组织和正常口腔黏膜组织中NF-
κBp65和ICAM-1的表达,探讨其在口腔鳞状细胞癌组织中的作用及临床意义。
1 材料和方法
材料来源
收集宁夏医科大学附属医院病理科2006年11月—2008年1月30例口腔鳞状细胞癌的组织标本存档蜡块,其中男22例,女8例,年龄30~72岁,。患者术前均未接受非甾体类消炎药治疗及放、化疗。10例正常口腔黏膜组织标本取自宁夏医科大学附属医院口腔科门诊自愿捐献口腔黏膜的健康志愿者,其中男4例,女6例,年龄21~52岁,。
主要试剂和仪器
主要试剂浓缩型鼠抗人NF-κBp65单克隆抗体;浓缩型鼠抗人ICAM-1单克隆抗体;PV9000免疫组化试剂盒;DAB显色试盒及多聚赖氨酸;阳性对照片。以上试剂均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。
实验方法
常规HE染色实验标本经常规石蜡包埋、切片、HE染色。
免疫组织化学染色Pv-9000法检测NF-κBp65和ICAM-1抗原,具体步骤按试剂盒操作如下:
①组织切片5μm,常规脱蜡至水,蒸馏水洗;②NF-κB、ICAM-1采用微波抗原修复(3档,10min),PBS洗3min×3次;③3%过氧化氢,37℃孵育10 min以抑制内源性过氧化物酶活性,PBS洗3min×3次;④一抗(NF-κB,1∶200;ICAM-1,1∶200)37℃孵育2h,PBS洗3min×3次;⑤滴加试剂1,37℃孵育20min,PBS冲洗,3min×3次;⑥滴加试剂2,37℃孵育30min,PBS冲洗,3min×3次;⑦DAB显色液显色5min,自来水冲洗终止反应;⑧苏木精复染,脱水,