PTEN表达与宫颈癌预后相关性分析.doc

PTEN表达与宫颈癌预后相关性分析
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:李洪凌朱向辉姜新曲雅勤
【关键词】宫颈癌;PTEN基因表达;实验研究
磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)基因是一种重要的抑癌基因,在50%~80%的实体瘤中发生突变〔1〕,并且与肿瘤的进程和预后相关。在最近一系列研究中,PTEN基因低表达在0%~37%,而突变低于17%〔2~4〕。血管生成在子宫颈癌的进展中具有重要作用,子宫颈癌预后和PTEN基因表达的关系目前还没有完全明确。为了探讨PTEN表达和子宫颈癌预后之间的关系,本研究观察了2000~2005年宫颈癌患者PTEN表达情况与疗效的相关性。
1 材料与方法
临床资料 60例患者,年龄34~72岁,平均(49±)岁,按FIGO分期为Ⅲ~Ⅳ期宫颈癌,均为初治,远期生活质量评估量表(KPS)评分60分,治疗前肝肾功能、血常规、心电图正常。Ⅲ期48例,Ⅳ期12例,采用同时放化治疗。
方法全部采用体外适形放疗并体内腔内放疗,同步采用柴杉醇顺铂联合(TP)化疗方案。PTEN一抗购自西美杰生物公司。采用免疫组化(ABC法)检测。 cm
× cm× cm大小,置入10%中性福尔马林液,固定24 h后脱水,石蜡包埋。选用抗PTEN单克隆抗体(北京西美杰生物公司),用ABC酶标染色。石蜡切片二甲苯脱蜡,梯度酒精水化;用小牛血清(1∶100)滴片,室温下孵育20 min;滴加PTEN McAB(1∶50),4℃冰箱过夜;滴加生物素化二抗,室温下45 min;滴加ABC免疫复合物,室温下45 min。上述各步均以TBS缓冲液冲洗3次,2~3 min/次;二氨基联苯胺(DAB)H2O2显色10 min,水洗,苏木精复染,盐酸酒精脱水,透明,中性树胶封片。通常以细胞核呈界限清楚的棕褐色反应作为阳性,增殖细胞核抗原(PTEN)染色结果判定,选择切片中最有代表性的视野,在放大200倍显微镜下,计数1 000个癌细胞中PTEN的阳性细胞核数,并计算出增殖指数(PI)(PI=PTEN 阳性细胞数/1 000)。将PI>20%视为高表达。
统计学分析数据以x±s表示,。
2 结果

在PTEN高表达组1、3、%、%、%;PTEN低表达组1、3、5年生存率分别为75%、%、%;1、3年生存率两组没有明显差异(P>),5年生存率有明显差异(P<)。见图1、表1。
图1 病理标本免疫组化照片(×400)(略)
表1 TEN不同表达组生存率比较(略)
3 讨论

PTEN基因是迄今为止发现的第一个发现具有磷酸酶活性的抑癌基因,阻滞细胞周期,抑制细胞的生长发育和诱导凋亡。其作用机制之一是阻断磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)信号通路,抑制磷酸化蛋白激酶B(Akt)活性,而Akt在肿瘤生长和增殖中起着重要作用〔5,6〕,而在宫颈癌的表达目前还没有明确的文献阐述。本实验利用免疫组化技术检测PTEN蛋白的表达水平,将患者分为高表达和低表达两组,观察不同组别宫颈癌患者长期生存率的差别。在PTEN