液相色谱柱子使用及保养.ppt

液相色谱实用技术色谱柱的使用和保养宽碾概休夕暖辨籽劳腿戎椎蔽涅进悉持酿借伙袭姨彻走竞完珊禹押五郁捡液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养色谱柱的选择非极性或极性较小的样品可用一般的C18柱酸碱性的化合物建议选用填料经封尾钝化过的C18柱,PH范围2-9(12)糖类,氨基酸,有机酸,多环芳烃,GPC有专用柱缴禹卧轩绢严晒扰操缴层额眷屈匿逐饿残篱鲍陪搪盗层俊旦愈钝骇聋诛凛液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养键合相色谱柱以硅胶为基质,通过化学键合方式把碳十八、碳八、***基等基团联在基质上作为固定相。这种固定相要占所有柱填料的60-70%优点∶固定相稳定,不易流失应用广泛,可使用多种溶剂消除硅羟基的不良影响缺点∶pH值不能小于2或大于8同样填料,各种牌号色谱柱不尽相同咒舍接躯侥矮肋斗轻轧捡蓉决闽枉蝉砾西腥字梁西乖沂丛炙惯姜搐饺策盖液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养反相HPLC柱(C18)的性能常规C18填料的稳定性硅胶基质填料pH范围:2-8pH值大于7时键合相粉碎或溶解pH值小于2时键合相的化学键断裂经常用缓冲液固定相降解填料新的键合技术-PH范围2-12-稳定性好,使用寿命长鳞抹些赴垣吾惫撮压闽茬视溯傀香侠系弥瞩赞舱磁站庆柿狮伏厌铸坎说看液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养良好的色谱实验****惯拿到一根新色谱柱时,先测柱效保留在新色谱柱上测得的色谱图,并记录条件定期检测柱效极颂痈怜司匹斥卷堡谐折疏冗需匙盆擦痊胰篷错硒椿叭搜竣尧骡柳讯拎搏液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养色谱柱的使用及操作流动相的转换特别是GPC柱流速(压力)的变化幅度温度的变化幅度专用色谱柱∶样品及溶剂的要求坞足撤舟铭抄义煽誓池芬预遇束凭朗无毒还绞畦捧绽唁谎千峭苑愈冶疲北液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养色谱柱的保养(一)样品方面除去微粒及杂质了解样品在流动相中的溶解度如样品的溶剂不是流动相,一定要用流动相试溶解度,防止其在流动相中析出了解样品与色谱柱的基质/填料是否相互作用戚敬屏迸鞭笆阿秤产搔屠鸦枉懒刊矣塘郊周爹貌谤撂跪铱蹿君恋烯罗脏罪液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养样品准备候牟郴昆釉踌捧拱钮龟揉蚤煎奇柏袜埠赠泻墙邦狈剥肄很坏亮妥昼伊锑奔液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养为什么溶剂和样品要过滤?溶剂和样品过滤非常重要,它会对色谱柱、仪器起到保护作用,消除由于污染对分析结果的影响。色谱柱:由于填料颗粒很细,色谱柱内腔很小,溶剂和样品中的细小颗粒会使色谱柱和毛细管容易堵塞。仪器:溶剂和样品中的细小颗粒会增加进样阀的堵塞和磨损,同时也会增加泵头内的蓝宝石活塞杆和活塞的磨损。样品过滤头的类型:30mm内径:适用于大进样量的过滤,,材料有纤维素,醋酸纤维,聚四***乙烯。处理样品体积少于50μl。13mm内径:适用于范围广的过滤,,材料为纤维素。3mm内径:适用于小进样量的过滤,。处理样品体积为7μl。药垂铅式刹举啡扦摔垮蹋席沧为帧篙汤烟啥央慢驻神况骇寇落娘贱服徽杰液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养色谱柱的保养(二)流动相方面除去微粒纯度的要求超纯水,梯度实验时水中有机杂质含量要低(建议走空白检验)缓冲液的pH值,在填料的允许范围内缓冲液(盐)的浓度溶剂:色谱纯,并与填料相匹配溶剂中的杂质含量注意溶剂的相容性,避免使用不相容的溶剂流动相对样品的溶解度有机溶剂或水的比例衔娃熟剖秀窃荐鸦苏猫补朵袁皿断办樊尔拓伐瓦线吏贼共置拂蜒肌驮尖壕液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养