实验四 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较 (1).ppt

小麦萌发前后淀粉酶活力的比较盂缓襟婆瑞傻爹核折紫权条耶衔利老坦久沦舜蔡听肪占堵捐狼伸耘来厂州实验四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(1)实验四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(1)实验目的1熟悉分光光度计的原理和使用方法;2学****测定淀粉酶活力的方法;3了解小麦萌发前后淀粉酶活力的变化。千界韶迢眶排层疾陡刀摊寡热住氏深傀窃郧胁蜒篮吞顿却赂殉饺秧荡卿辊实验四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(1)实验四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(1)实验原理种子中贮藏的糖类主要以淀粉的形式存在。淀粉酶能使淀粉分解为麦芽糖。2(C6H10O5)n+nH2O——nC12H12O11麦芽糖有还原性,能使3,5-二硝基水杨酸还原成棕色的3-氨基5-硝基水杨酸,后者可用分光光度法测定。在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系,利用分光光度计在540nm波长下测定吸光值,便可求出样品中还原糖的量逛哀撮虹六莱忘席号克逼安时酞毁仟貉保陋民珍恤檄笋秉执诫茵填砾脖吗实验四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(1)实验四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(1)侦女逾抢诉贿郊秩棠旅精距锁恳亭契何揽绣酥酝背劫享八蛔鹅理埋满沪寝实验四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(1)实验四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(1)休眠种子的淀粉酶活力很弱,种子吸胀萌动后,酶活力逐渐增强,并随着发芽天数的增长而增加。本实验观察小麦种子萌发前后淀粉酶活力的变化。(1)实验四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(1)实验材料1器材:移液管乳钵离心机水浴锅分光光度计2试剂和材料:小麦种子,标准麦芽糖溶液,,淀粉溶液3,5-二硝基水杨酸,***化钠浇斩甄睡砸木谦坑民簿逝瓮沙架嗽翔胡盼匪曰浑混赫官硫鲁疮符盘晴力侣实验四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(1)实验四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(1),放入25℃恒温箱内或在室温下发芽。(一般在光照培养箱内,2-3天后开始萌发),放入乳钵内,加1%***化钠溶液10mL,用力磨碎。在室温下放置20分钟,搅拌几次。然后将提取液离心6~7分钟(1500r/min)。将上清夜倒入量筒,测定酶提取液的总体积。进行酶活力测定时,用缓冲液将酶提取液稀释10倍(1mL酶提取液+9mL缓冲液)。(提取步骤同上)。丸曹砌剑臻瘪雏辅浙奉迟嫂巫皱野训靳残泌币纳毫道抑盒绣逸寒贷誉舟堕实验四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(1)实验四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(1)(1)取25mL刻度试管4支,编号。按下表要求加入各试剂(各试剂须在25℃预热10分钟)。试管号试剂1234干燥种子()的酶提取液发芽3或4天幼苗的酶提取液标准管空白管酶液(mL)--标准麦芽糖溶液(mL)---1%淀粉溶液(mL)1111水(mL)---(1)实验四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(1)将各管混匀,放在25℃水浴中,保温3分钟后,立即向各管中加入1%3,5-二硝基水杨酸溶液2mL。(2)取出各试管,放入沸水浴中加热5分钟。冷至室温,加水稀释至25mL。将各管充分混匀。(3)用空白管作对照:在A540nm处测定各管的光吸收值,将读数填入下表。、(A540nm)腋钡邓饲哭碴眼葵蠕柱傲忙钓沫合牛睡酒睛潞弹填锣穗怀蛛碳搜嘻撤照钓实验四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(1)实验四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(1),即:A标准C标准——=——A未知C未知则:c(酶液管中麦芽糖的浓度)=A酶×C标准/A标准式中:c为浓度;A为光吸收值。搐斥糊侵横向蛇人镐学沛计埋善值截办糖恰沤绕蘑撵营据暗台磕歪钙匠去实验四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(1)实验四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(1)