免疫荧光双重染色的激光共聚焦显微镜样品制备及观察..doc

[文章编号]100028861(20070320344203免疫荧光双重染色的激光共聚焦显微镜样品制备及观察路菊,孙玮,陈德英(第三军医大学高原军事医学系中心实验室,重庆400038[收稿日期]2007-01-22;[修回日期]2007-03-19[作者简介]路菊(1964-,女,安徽安庆市人,实验师,本科,主要从事扫描电镜方面的研究。(Tel023268752350;(******@mail.[摘要] 目的详尽介绍免疫荧光双标染色方法,为激光共聚焦显微镜观察提供理想的样品。方法大鼠腹腔注射Brdu,40gΠL多聚甲醛灌注固定,取脑组织冰冻切片,用抗GFAP多克隆抗体孵育和FITC荧光标记二抗染色,再用抗Brdu单克隆抗体孵育和Cy3荧光标记二抗染色,在激光共聚焦显微镜下连续断层扫描,图像叠加。结果清晰可见处于增殖期(S期细胞胞核呈红色荧光,星形胶质细胞胞质呈绿色荧光。结论影响免疫荧光双重标记样品效果的环节和因素很多,其中最重要的因素是2个一抗的搭配和协调。[关键词] 免疫荧光;双重标记;激光共聚焦显微镜[中图分类号] [文献标识码] APreparationofimmunofluorescencedoublestainingsampleforlaserconfocalmicroscopeLUJu,SUNWei,CHENDe2ying(CentralLaboratory,CollegeofHighAltitudeMilitary,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400038,China[Abstract] Objective Ratswereinjected, Redfluorescencewasdyedinthenucleus( .[Keywords]Immunofluorescence;Doublestaining;Laserconfocalmicroscope 随着